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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 蛋白表达疑问
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twisty

木虫 (正式写手)

newer

[求助] 蛋白表达疑问

纯化出来的目的蛋白经鉴定为糖蛋白，在做原核或真核表达时是否须要将其所连接的糖链切去？如果须要应用何种方法？

[ 来自科研家族 Natural Products家族 ]
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1楼 2011-12-23 11:33:46
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AnaSequence

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜(金币+1): 鼓励交流 2011-12-24 15:31:28
糖基化是翻译后修饰,原核表达一般缺乏糖基化修饰系统,所表达的蛋白没有糖链.真核一般有糖基化,但是不同的宿主,糖链的糖基和长度有差异.
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4楼2011-12-24 11:36:43
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西瓜(金币+3, MolEPI+1): Good！ 2011-12-24 15:31:13
twisty(金币+2): ★★★很有帮助 2011-12-25 09:18:17
做表达的时候基因都是只编码蛋白序列的，至于能不能糖基化、在什么位置糖基化、糖基化的程度和加上什么糖基等只跟宿主有关。你克隆的时候无须将其所连接的糖链切去的。
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2楼2011-12-24 00:30:38
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twisty

木虫 (正式写手)

newer
引用回帖:
楼: Originally posted by lxj341401 at 2011-12-24 00:30:38:
做表达的时候基因都是只编码蛋白序列的，至于能不能糖基化、在什么位置糖基化、糖基化的程度和加上什么糖基等只跟宿主有关。你克隆的时候无须将其所连接的糖链切去的。

常规的切去方法有哪些啊？没做过还请不吝赐教啊。
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兼并碱基M=A/CR=A/GW=A/TS=G/CY=C/TK=G/TV=A/G/C&n...
3楼2011-12-24 11:05:47
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ganchao1776

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
楼上几位说的很好，楼主要多补补分子生物和细胞生物的知识了；蛋白表达的过程：第一步是DNA转录为mRNA，第二步是转录后修饰（包括内含子的翦切与拼接、5'端加帽等，一般原核生物没有），第三步是翻译，即由DNA翻译为蛋白质，第四步为翻译后修饰（包括二硫键形成（有些是在翻译过程中进行，有些是在翻译后进行，原核生物不是很多），糖基化（包括O糖基化和N糖基化，在内网和高尔基体中形成，原核生物没有），酶原成熟(剪切、拼接、磷酸化、硫酸化)等）；你把这些搞懂了之后就会发现你的问题是一个错误的问题
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5楼2011-12-24 22:15:34
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