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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 关于PCR拖尾现象
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Icityman

铁虫 (小有名气)

[交流] 关于PCR拖尾现象

PCR跑出来是这个现象，体系优化了不少次，梯度降落都做过了，还是这样，求高手帮忙解决，谢谢啊！！

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1楼2011-12-22 16:37:46
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ellar

铜虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★ ★
Icityman(金币+1):谢谢参与
西瓜(金币+4): Good! 2011-12-23 23:45:01
pcr失败了 ，这非smear。建议阳性对照检验模板；检查引物特异性；三，分析目的基因GC含量，二级结构等，考虑用LA taq或KOD酶，或者体系加适量甘油或DMSO
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13楼2011-12-23 22:12:40
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harben

银虫 (初入文坛)
★
Icityman(金币+1):谢谢参与
引物设计有问题，换引物是最好最快的选择
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2楼2011-12-22 16:41:21
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Icityman

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by harben at 2011-12-22 16:41:21:
引物设计有问题，换引物是最好最快的选择

可是有拖尾不就是有克隆吗？
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3楼2011-12-22 18:04:24
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jinpeng_6118

木虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★
Icityman(金币+1):谢谢参与
西瓜(金币+3): 鼓励交流 2011-12-23 23:44:29
你这不是叫拖尾，根本就没有你的目的条带，不知道你是以什么为模版p的，如果是菌液的话就提取质粒为模版再试试，如果是质粒或DNA的话尝试着稀释100倍-1000倍再P下试试，前提是确认你的引物没问题，要不就是克隆里没的你目的片段
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4楼2011-12-22 19:19:35
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