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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 提的质粒跑的很宽，看大小，该看上面那条带，还是下面那条带
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5xiaosh

银虫 (小有名气)

[交流] 提的质粒跑的很宽，看大小，该看上面那条带，还是下面那条带 已有6人参与

问个很菜的问题，提的质粒跑的很宽，看大小，该看上面那条带，还是下面那条带？
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1楼 2011-12-20 14:15:17
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yuxia82012

木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
看前沿，就是下面那条
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在等待中涅槃重生
2楼2011-12-20 14:27:22
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Rubisco580

金虫 (小有名气)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
amisking(金币+2): 鼓励积极应助！ 2011-12-20 18:22:25
质粒的大小要酶切之后才能看出来，因为提取的质粒大部分是超螺旋，而超螺旋在凝胶中的迁移速率较线性的质粒快。
质粒提的好的话，电泳能看见3条带：最前面的超螺旋，中间的开环，最后的线性（也有说是复制中间体）。
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3楼2011-12-20 15:15:47
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5xiaosh

银虫 (小有名气)
引用回帖:
楼: Originally posted by Rubisco580 at 2011-12-20 15:15:47:
质粒的大小要酶切之后才能看出来，因为提取的质粒大部分是超螺旋，而超螺旋在凝胶中的迁移速率较线性的质粒快。
质粒提的好的话，电泳能看见3条带：最前面的超螺旋，中间的开环，最后的线性（也有说是复制中间体 ...

谢谢，酶切后看大小要比这样看准确，^_^，我提了两条带，这是目前为止我提的最好的带啦，O(∩_∩)O~
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4楼2011-12-20 15:29:42
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5xiaosh

银虫 (小有名气)
西瓜: 样品量太大，挤不下，条带就宽了。如果要条带细点，可以减少上样量，用窄的梳子来做胶。 2011-12-21 18:46:05
引用回帖:
楼: Originally posted by yuxia82012 at 2011-12-20 14:27:22:
看前沿，就是下面那条

不知道，我有时一样的质粒，加样浓度不一样，发现他们其实是上面（就是一线对齐的），而不是在二线对齐。我也纳闷了~
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5楼2011-12-20 15:30:59
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rintor

铜虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
你把上样体积减少一半后再跑胶看看就知道了
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不要轻易言败
6楼2011-12-21 11:27:37
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ccharlien

木虫 (正式写手)
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
西瓜(金币+1): 同意！光圈、曝光时间都可以调小。 2011-12-21 18:44:54
引用回帖:
5楼: Originally posted by 5xiaosh at 2011-12-20 15:30:59:
不知道，我有时一样的质粒，加样浓度不一样，发现他们其实是上面（就是一线对齐的），而不是在二线对齐。我也纳闷了~

那是你上样量太大了 光晕起来就看不清带了 扫胶时把光圈调小
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7楼2011-12-21 11:29:33
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5xiaosh

银虫 (小有名气)
引用回帖:
楼: Originally posted by rintor at 2011-12-21 11:27:37:
你把上样体积减少一半后再跑胶看看就知道了

嗯(^_-)
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8楼2011-12-21 11:30:09
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neon_alone

木虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
应该酶切之后看大小。
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9楼2011-12-22 14:04:28
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5xiaosh

银虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by neon_alone at 2011-12-22 14:04:28:
应该酶切之后看大小。

那酶切之后 还跑这么宽  看一线还是看二线呢 ？
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10楼2011-12-22 14:22:55
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