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laoyisng1122

铁虫 (正式写手)

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[交流] 做了几次PCR CT值都有变化怎么办？谢谢大家！！

荧光定量PCR标准品的问题
我自己用质粒做的标准品，可是做了几次PCR CT值都有变化怎么办，还有标准品在4度好，还是-20好，如果4度能保存多长时间

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1楼 2011-12-14 12:11:15

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ccharlien

木虫 (正式写手)

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引用回帖:

17楼: Originally posted by laoyisng1122 at 2011-12-20 11:15:18:
首先谢谢诸位热心回答
做标准品的时候，两个质粒都测OD值了，因为我最后要计算同一样本两个基因的值的比，如果二者扩增效率不一致，怎么进行计算啊。我现在做的其中一个基因在10 8 copies/ul的时候CT值在8左右， ...

效率不一致是很正常的一般来说你的引物和探针确定了之后扩增效率就差不多定下来了不同的反应体系会对其有一定程度的影响你可以尝试一下
计算很容易啊有标准曲线就不用CT值算了用标准曲线的方法做相对定量
而且你用质粒做的标准品可以做绝对定量了何必纠结CT值