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多态性条带怎么统计?有图,大家帮帮忙。谢谢
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我做ISSR的,这张图,是9个个体,一对引物得到的结果。很多说法是计0和1,但是如果是不同的电泳图,产物的位置可能会有差异,这个多态位点还可靠吗?有没有介绍统计这些图的资料啊?文献说的也不全,搞不懂啊。急死人了![]() ![]() ,谢谢各位高手帮忙![ Last edited by 1949stone on 2011-12-27 at 12:59 ] |
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Sarah_Shy
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【答案】应助回帖
陈年芬芳: 回帖置顶 2011-12-09 20:03:40
1949stone(MolEPI+1): very good 2011-12-27 12:59:23
1949stone(MolEPI+1): very good 2011-12-27 12:59:23
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这个条带统计是蛮烦的,你们实验室没人做吗?可以请教下。我毕业论文就是做的就是这个,在这里我怕说了你也很难理解。我将就说一下看你自己理解吧。 统计条带你是先看同一个引物所有样品总共得到多少个位点,然后再分别看每一个样品哪个位点没条带就记为0,哪个位点有条带记为1. 就比如你这张图,9个样,总共有5个位点,为了方便我这里从上往下标注为1,2,3,4,5。第一个样3和5的位点上有条带,记为00101。第二个样和第三个样时一样的都是3位点上有,记为00100.第四个1,5位点有,记为10001.第五个样1,2,5位点有,记为11001.第六个样1.2.4位点有,记为11010.第七个样3.5位点有,记为00101.。。。下面你自己看吧,应该能理解了吧。 至于统计软件一般文献上都是有的,你自己好好查查看吧,不同的软件用于不同的分析。 |
4楼2011-12-09 15:54:03
Sarah_Shy
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【答案】应助回帖
陈年芬芳: 回帖置顶 2011-12-12 12:13:55
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基本上,一个引物对不同样本的扩增得到的条带都差不多,你可以对比maker看条带大致的位置,纵观一个引物所有样本的扩增条带,大致确定有多少条带,条带大小为多少,然后再分别看每个样本的带型进行统计。分子标记最后的条带本来就是靠人为的统计,只能靠自己的感觉去判定。这个0,1矩阵的输入真的是很累人的一件事情,胶图一定要跑的好将来会方便很多。 有什么问题你再问吧,我可能不能及时回答你,但一有空就会上来看的。你现在先把条件优化的好一点,争取把胶图跑好,统计条带要等所有样本都跑完了才能统计,所以也不及。做PCR跑胶也是一个很耗时间的事情。 |
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7楼2011-12-11 21:17:27
8楼2011-12-12 12:13:29
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★
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陈年芬芳(金币+2): ★★★很有帮助 谢谢啦!很有帮助! 2011-12-27 12:40:54
wanhscn(金币+6): 鼓励应助!很好!先记下 whs! 2011-12-27 14:39:16
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wanhscn(金币+6): 鼓励应助!很好!先记下 whs! 2011-12-27 14:39:16
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补充一些内容: 将所有样品跑出图后,可以用gel-pro analyzer进行定量分析,因为这个软件可以根据不同分子量在容许范围内列出不同行,例如: 3886 3857 2182 2200 1985 1985 1776 1788 1776 1600 1624 1612 1400 1400 1330 1390 1192 1136 1192 994 994 这样可以手动将有数字的改成“1”,没数字的改成“0“,然后用NTSYS软件进行聚类分析,构建树状图。 提示:电泳尽量要跑好跑齐,最好有两个或多个标准分子量,这样在构建树状图时可以观察标准分子量的相似度是否很高,如果不高,说明电泳效果很差。 |
9楼2011-12-27 10:57:33
liuqinggc065
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