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多态性条带怎么统计?有图,大家帮帮忙。谢谢
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我做ISSR的,这张图,是9个个体,一对引物得到的结果。很多说法是计0和1,但是如果是不同的电泳图,产物的位置可能会有差异,这个多态位点还可靠吗?有没有介绍统计这些图的资料啊?文献说的也不全,搞不懂啊。急死人了![]() ![]() ,谢谢各位高手帮忙![ Last edited by 1949stone on 2011-12-27 at 12:59 ] |
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【分子生物】EPI帖 |
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【答案】应助回帖
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感谢参与,应助指数 +1
陈年芬芳(金币+2): ★★★很有帮助 谢谢啦!很有帮助! 2011-12-27 12:40:54
wanhscn(金币+6): 鼓励应助!很好!先记下 whs! 2011-12-27 14:39:16
感谢参与,应助指数 +1
陈年芬芳(金币+2): ★★★很有帮助 谢谢啦!很有帮助! 2011-12-27 12:40:54
wanhscn(金币+6): 鼓励应助!很好!先记下 whs! 2011-12-27 14:39:16
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补充一些内容: 将所有样品跑出图后,可以用gel-pro analyzer进行定量分析,因为这个软件可以根据不同分子量在容许范围内列出不同行,例如: 3886 3857 2182 2200 1985 1985 1776 1788 1776 1600 1624 1612 1400 1400 1330 1390 1192 1136 1192 994 994 这样可以手动将有数字的改成“1”,没数字的改成“0“,然后用NTSYS软件进行聚类分析,构建树状图。 提示:电泳尽量要跑好跑齐,最好有两个或多个标准分子量,这样在构建树状图时可以观察标准分子量的相似度是否很高,如果不高,说明电泳效果很差。 |
9楼2011-12-27 10:57:33
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我说的marker就是一样的marker,主要是看电泳效果,如果两个marker的条带基本都在一条线上的话,说明效果比较好。至于标准分子量相似度没有做过,我在做0、1时直接将marker删除了。 至于两张不同时期电泳图条带分布不一样的问题,我是这样解决的,仅供参考: 1)对凝胶成像软件进行设置,我的是Image Lab,可以建立一个实验协议,对于成像的位置、大小都规定好,每次放胶的时候都放在那个位置,这样可以稍微保证图片基本一致。 2)使用photoshop软件,对其中一张图片进行图像大小的重新设置,从而使图中Marker条带与另一张基本一致,之后进行拼接,因为Gel-pro只能对一张图片产生excel表,如果分别分析的话,之后的0、1表不太好合并 即便这样,误差也是非常地大,目前准备接触bionumerics软件,这个软件貌似能解决这些问题,功能比较齐全,不过没有盗版,而且非常贵。 |
17楼2012-06-29 09:19:54














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