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mxlo.o

金虫 (正式写手)

应助: 2 (幼儿园)
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专业: 微生物资源与分类学

[求助] 霉菌提取RNA后的RT-PCR

我现在做一种霉菌的RT-PCR，RNA之前总是提取不出来，昨天终于把RNA提取出来了，但是做了反转录之后用特异性引物扩增目的片段，结果一个目的基因有带，但是非常模糊，而且出现了非必须的条带；另一个则没有出带。请问一下可能的原因是什么？是不是用的循环数比较少，我用的是30个循环。还是因为其它的原因。

RNA提取电泳

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1楼 2011-11-30 15:30:33

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yupeibin

禁虫 (正式写手)

mxlo.o(金币+1): 2011-12-09 22:13:59

本帖内容被屏蔽

2楼2011-11-30 18:03:24

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hitlenaf

铁虫 (初入文坛)

应助: 2 (幼儿园)
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专业: 微生物资源与分类学

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
mxlo.o(金币+1): 2011-12-14 17:48:22

非特异性扩增很严重啊，和循环数没关系。这个事很难解释为什么，我每次出现这种情况的时候，要不就换模板重P了，要不就换PCR药品了，要不就重新换个温度。

3楼2011-12-14 11:52:45

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