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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 如何克隆一个在小鼠、大鼠中序列已知，但在人未知的基因？
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hs2451

木虫 (正式写手)

[求助] 如何克隆一个在小鼠、大鼠中序列已知，但在人未知的基因？

RT，请教各位大侠，用神马方法啊？
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中国是不朽的
1楼 2011-11-23 15:49:36
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凡子1985

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
西瓜(金币+3): 鼓励交流！对于两个序列都知道的物种，先用生物信息学的方法比对，省时省力。如果基因不大，用基因组DNA也可以了，cDNA涉及RNA提取和反转录，要麻烦些，成本也高些。 2011-11-23 20:44:16
wanhscn(金币+6, MolEPI+1): 完全正确，以cDNA模板为先，后再拿基因组序列，因为有可能内含子很大！授予专家指数！ 2011-11-25 12:01:49
引用回帖:
4楼: Originally posted by hs2451 at 2011-11-23 17:08:17:
谢谢您！还想请教下，可不可以分别将大小鼠的这个基因与人类的全基因组进行比对呢，这样能不能找出人类中的这个基因啊？或者，可以将大小鼠的同源性序列与人类基因组比对从而得到结果吗？麻烦了！

2楼是错误的  但凡能PCR出来的 你用序列比对 做电子克隆 就都知道了 何必去做这个实验呢  那都是后续的事情 你首先要做的 是比对出可能的序列来 而且 后续也不是以染色体基因组为模版 而是以cDNA为模版
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6楼2011-11-23 19:55:39
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hs2451

木虫 (正式写手)
肿么木有大侠帮忙啊？
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中国是不朽的
2楼2011-11-23 16:30:20
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
西瓜(金币+3): Good! 2011-11-23 20:38:47
hs2451(金币+5): 谢谢帮助 2011-11-23 21:57:23
比较小鼠和大鼠中该基因的同源性，根据同源区设计引物，以人染色体为模板扩增获得该基因的部分片段，测序后做RACE获得全长基因。
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3楼2011-11-23 16:52:37
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hs2451

木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by lxj341401 at 2011-11-23 16:52:37:
比较小鼠和大鼠中该基因的同源性，根据同源区设计引物，以人染色体为模板扩增获得该基因的部分片段，测序后做RACE获得全长基因。

谢谢您！还想请教下，可不可以分别将大小鼠的这个基因与人类的全基因组进行比对呢，这样能不能找出人类中的这个基因啊？或者，可以将大小鼠的同源性序列与人类基因组比对从而得到结果吗？麻烦了！
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中国是不朽的
4楼2011-11-23 17:08:17
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