应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 大肠杆菌电转感受态细胞的制备中遇到的问题
51/1返回列表
查看: 3823  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

clx@6016

金虫 (小有名气)

[交流] 大肠杆菌电转感受态细胞的制备中遇到的问题 已有6人参与

各位虫友好，想请教下大肠杆菌电转化方面的一些问题，希望各位虫友多多指教 .最近一直在做电转化，可每次制备的电转化感受态细胞都不行，最开始做的还可以达到10的六次方，可最近两次做的，貌似做好的电转化感受态细胞里面的菌体全都死了？是为什么呢？有人有遇到这种情况的吗？还望各位网友多多指教，感激不尽哈！急急急！！！
回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

dnaxxx

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-11-21 11:12:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wsws987

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
制作过程尽量轻柔，而且要基本都在冰上操作
赞一下 回复此楼
8楼2018-07-26 19:09:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

shuangzi8761

银虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
把你的步骤说说呗
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2011-11-26 17:32:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chenchuan24891

木虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
zhang8826857(金币+3): 鼓励新虫，鼓励继续帮助lz解决问题 2011-11-27 10:57:54
你应该自己好好去按文献的方法检查一下，大多数情况下是自己的失误造成的。如果还是这样的话，请你把你做的步骤给大家看一下。
赞一下(3人) 回复此楼
3楼2011-11-27 09:59:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

clx@6016

金虫 (小有名气)
引用回帖:
1楼: Originally posted by clx@6016 at 2011-11-21 11:12:34:
各位虫友好，想请教下大肠杆菌电转化方面的一些问题，希望各位虫友多多指教 .最近一直在做电转化，可每次制备的电转化感受态细胞都不行，最开始做的还可以达到10的六次方，可最近两次做的，貌似做好的电转化感受态 ...

先把新鲜划好的菌接到含有Amp的3mlSOB试管中，30度过夜培养，第二天以1:50的接种量转接到50ml含有Amp的SOB中(转接之前加入MgCl2)，30度摇菌2小时，OD600为0.1左右，然后加入L-阿拉伯糖诱导35分钟，OD600为0.3-0.4左右。5000转，4度离心10分钟，收菌。然后用10%甘油重悬3次，5000转，4度离心10分钟。最后将菌体浓缩500到800倍后保存在10%甘油中。然后立刻电转！如果有什么问题，还请各位前辈多多指教哈！
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2011-11-28 21:22:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[博后之家] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 h4CP7TrQR8Lg 2026-08-22 4/200 2026-08-23 20:46 by 0p9y1isJp2jM
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 5/250 2026-08-23 19:43 by lXgU0RvNTDC9
[考博] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 5/250 2026-08-23 19:22 by lXgU0RvNTDC9
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-21 5/250 2026-08-23 19:10 by lXgU0RvNTDC9
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 h4CP7TrQR8Lg 2026-08-22 3/150 2026-08-23 16:30 by lXgU0RvNTDC9
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-21 5/250 2026-08-23 14:33 by KM5EcsNQRBPn
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-21 6/300 2026-08-23 14:21 by KM5EcsNQRBPn
[基金申请] 今天放榜吗？ +15 布布和一二 2026-08-19 16/800 2026-08-23 09:55 by 张春生
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 DpSrDtM079iu 2026-08-22 5/250 2026-08-23 04:07 by OEbVnUOu01ol
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 7/350 2026-08-23 03:43 by OEbVnUOu01ol
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 6/300 2026-08-23 03:40 by OEbVnUOu01ol
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +7 且听虎啸 2026-08-17 8/400 2026-08-22 21:55 by 医学老男孩
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +3 炎黄贵胄 2026-08-22 4/200 2026-08-22 20:02 by mycsru
[基金申请] 放榜前的不淡定 40+4 snowwithsea 2026-08-19 14/700 2026-08-21 23:51 by cratir
[基金申请] 我面上完蛋了 +7 且听虎啸 2026-08-20 8/400 2026-08-21 12:31 by 酷酷墨镜
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +9 yuleib84 2026-08-19 11/550 2026-08-21 10:06 by gltch
[基金申请] 估计是周四 +3 archvillain 2026-08-18 3/150 2026-08-21 01:48 by jnhyjjm
[基金申请] 今天系统多次维护，明天很可能放榜！ +10 zju2000 2026-08-16 11/550 2026-08-20 20:02 by cl479861084
[基金申请] 时间戳变了，能看出什么问题？ +18 基诺咪客 2026-08-17 23/1150 2026-08-20 17:19 by Godzela
[基金申请] 朋友圈看到的 +6 wangzilk 2026-08-18 8/400 2026-08-19 10:55 by Haru815
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭