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zhaolijunzly

金虫 (小有名气)

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[求助] TA克隆不长菌

我的TA克隆不长菌，阳性对照很好，说明感受态没有问题，氨苄的板子是刚配的，连接比例1：9左右，哪出问题了呢？望同仁们指教一二，不胜感激！

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1楼 2011-11-21 08:08:27

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Marado

金虫 (正式写手)

Dreamer

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专业: 生物化学

我目前也遇到了这个问题，
加A后PCR产物：2ul
pMD 19：0.5ul
Buffer（solution I）3.5ul
过夜连接：12-16h
之后用JM109感受态细胞进行转化
涂LE平板（1ml的100mg/ml 氨苄加入到1L的LB培养基）
昨天下午2点半涂完平板（100ul菌液）
37℃培养到晚上10点半，之后置于室温下（20℃）到今早，发现没长- -