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zhaolijunzly

金虫 (小有名气)

[求助] TA克隆不长菌

我的TA克隆不长菌,阳性对照很好,说明感受态没有问题,氨苄的板子是刚配的,连接比例1:9左右,哪出问题了呢?望同仁们指教一二,不胜感激!
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gjs713

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

转化效率低;
连接有问题。
勤奋、执着、专注,则无坚不破。
3楼2011-11-21 10:23:50
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j2

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


wanhscn(金币+1): 鼓励交流 2011-11-21 11:07:31
加入感受态的质粒量在5ul内?
目的基因扩增是用高保真酶的话加A了?
目的基因和质粒是否保持良好?
修炼ing,当虫仙……
2楼2011-11-21 10:17:22
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wenqian0216

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
zhaolijunzly: 金币+5, 有帮助 2012-05-26 10:40:28
应该是连接有问题,延长连接时间。
或是回收电泳时有核酸酶末端TA被水解了,建议回收电泳前处理电泳槽
4楼2012-05-19 09:50:31
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水月寺学徒

金虫 (小有名气)

江湖浪子,行游诗人

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
zhaolijunzly: 金币+5 2012-06-10 13:27:47
链接比例1:9不是很好吧,如果胶回收亮度还可以建议直接1:1就很好连了,目的片段浓度太高会影响连接质量的
活出生而为龙的狷狂
6楼2012-06-07 18:15:40
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