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wwsw38

铁虫 (小有名气)

[求助] 请各位虫友帮我分析一下，为什么 我的DGGE没有条带呀！！！！！！！！！ 已有1人参与

图1：肠道双歧杆菌的PCR产物，510BP


图2：DGGE图，45－55的梯度。条带这么少？。。。。。有的完全没有条带！


图3：调成40－70后，加3微升的量，仍然没有条带。还变成黑乎乎的一片了！




虫友位帮我分析下，这是个什么情况嘛？

图1
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为自己加油
1楼 2011-11-18 20:47:50
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在雨中

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

wwsw38(金币+3): 谢谢你的回答。图2我只加1微升的样，有的条带就很亮了。加3微就黑了，所以不敢多加啊 2011-11-19 16:18:07
1. PCR产物挺好的，目标条带亮，没有非特异性扩增。
2. LZ你讲，你的DGGE加样3微升？这么少。我们一般都是20-30ul的样子呀。
3.第一个DGGE图挺正常的，也许你的样品中的条带种类本来就少。呵呵。PCR产物扩增好最好马上或者间隔不要超过12h去DGGE，相信LZ不会有这个问题。
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5楼2011-11-19 15:39:58
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在雨中

金虫 (著名写手)
引用回帖:
1楼: Originally posted by 攸攸乐也 at 2011-12-30 14:10:19:
楼主最近做的咋样了？跑出条带没？我也是做DGGE跑不出条带！不知道什么原因呢？试剂全部重新配的，样品是重新跑P的。但就是什么都跑不出来。同样的样品，我九月份跑的还挺好，很多条带。。。

这个跟人品也有关系的。呵呵。
注意实验细节。你会成功的。
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15楼2011-12-30 17:09:41
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