24小时热门版块排行榜    

查看: 3419  |  回复: 19
【悬赏金币】回答本帖问题,作者xan36将赠送您 1 个金币
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

xan36

新虫 (小有名气)

[求助] 请问血清RNA怎样提取?又怎样验证已提取出血清RNA?已有7人参与

如题:请问血清RNA怎样提取?又怎样验证已提取出血清RNA?
谢谢!!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

风雨后的阳光更珍贵
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

longrna

新虫 (正式写手)

★ ★
wanhscn(金币+2): good!鼓励交流! 2011-11-19 18:31:46
人血液(全血,也就医学上说的外周血)中RNA的含量很低,1ml一般在3ug左右(1-7ug)。一般是处理抗凝血液。
像以上全血的RNA提取有两种思路:
1)直接处理抗凝的全血,即加入如Trizol的裂解液直接往下做。此方法有个缺点:处理的体积血液体积有限,一般1ml Trizol处理100ul血液,最多不超过200ul.
2) 先去除血液中的红细胞分离出其中的白细胞(即淋巴细胞),然后提取白细胞的RNA。此方法的缺点:只能提取得到淋巴细胞的RNA,血液中游离的如病毒RNA无法提得。

你的血清是直接离心分离的吗?  如果只是做PCR,估计你直接弄200ul加Trizol提取就可以了。如果不行再从长计议。。。


血液是很复杂的。。。
伟大航线....
4楼2011-11-18 09:52:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 20 个回答

longrna

新虫 (正式写手)

有多大体积的血清?什么物种?提到后续实验做什么?要多少ng RNA?有什么特殊要求?
伟大航线....
2楼2011-11-17 16:12:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xan36

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by longrna at 2011-11-17 16:12:26:
有多大体积的血清?什么物种?提到后续实验做什么?要多少ng RNA?有什么特殊要求?

有1ml左右的血清,是正常人的,想验证下血清中有没有我所要的目的基因,想提出来后做个PCR,要求的话符合PCR扩增的要求就可
谢谢!
风雨后的阳光更珍贵
3楼2011-11-18 08:32:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xan36

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by longrna at 2011-11-18 09:52:38:
人血液(全血,也就医学上说的外周血)中RNA的含量很低,1ml一般在3ug左右(1-7ug)。一般是处理抗凝血液。
像以上全血的RNA提取有两种思路:
1)直接处理抗凝的全血,即加入如Trizol的裂解液直接往下做。此方法 ...

谢谢您的回复!
我现在是想提出血清中的RNA,也就是外周血经过离心后的上清。
我现在想看下我的目的基因是否在血清中也存在,我用Trizol提取了血清中的RNA,但是不知道是否提出来,怎样检测已经提出血清中的RNA?比如用一种内参,但是好像b-actin不行,因为血清中没有b-actin
风雨后的阳光更珍贵
5楼2011-11-18 10:01:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
不应助 确定回帖应助 (注意:应助才可能被奖励,但不允许灌水,必须填写15个字符以上)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 纠结退学ing +16 幽皮皮皮 2024-12-22 25/1250 2024-12-22 22:41 by 一天567
[考博] 读博的欲望达到了巅峰 +16 小丸九 2024-12-17 16/800 2024-12-22 21:00 by 流..
[基金申请] 大论文改改变成项目申请书 +4 wusiqi2020 2024-12-21 4/200 2024-12-22 19:48 by 阿凡达C
[论文投稿] 挑数据是造假吗 +8 电话的建设 2024-12-21 8/400 2024-12-22 18:01 by beefly
[教师之家] 为啥很多高校老师不愿意当副院长? +10 意得辑_editage 2024-12-18 13/650 2024-12-22 17:30 by fqcgfqcgfqcg
[有机交流] 装柱干法上样 +4 刘松垚 2024-12-20 4/200 2024-12-22 14:24 by 88817753
[硕博家园] 脂质氧化 +3 song794 2024-12-22 4/200 2024-12-22 14:12 by song794
[考博] 中山医学院生物信息申博 +3 wcy98117 2024-12-22 3/150 2024-12-22 13:42 by k1f01@4s
[硕博家园] 有未就业的博士吗? +9 大发财树 2024-12-22 9/450 2024-12-22 13:36 by 25v11@c6
[教师之家] 在学校是提拔成处长难度大还是教授难度大 +9 akslis2024 2024-12-17 12/600 2024-12-22 12:32 by Quakerbird
[论文投稿] 投稿期刊 5+4 王丽媛西西西 2024-12-17 7/350 2024-12-22 04:44 by yudaoqian88
[考博] 华南理工大学 “新能源交叉创新团队--主动安全”课题组招收海外联合培养博士生 +4 hubble 2024-12-20 5/250 2024-12-21 16:16 by 那片叶落
[教师之家] 学校排名靠前发展好,最大的受益者是校领导还是普通老师? +6 akslis2024 2024-12-17 7/350 2024-12-21 11:22 by 凌晨一点393
[教师之家] 你们都降薪了吗? +10 红枣葡萄干 2024-12-18 10/500 2024-12-20 17:32 by 开心就好56
[论文投稿] Transportation Research Part C 投稿模板 5+3 Yetzirah 2024-12-20 4/200 2024-12-20 16:32 by 北京莱茵润色
[硕博家园] 柔性引进硕博人才 +6 大发财树 2024-12-20 6/300 2024-12-20 15:32 by owlmac
[有机交流] 请问液溴开封后没有密封,放一年会变质吗? +9 rommel1975 2024-12-16 9/450 2024-12-20 11:01 by 2005127239
[教师之家] 某老师在组会上总是针对我带的学生怎么办? +15 lice_1987 2024-12-17 23/1150 2024-12-20 04:50 by 胖胖的大海
[论文投稿] Molecular Crystals and Liquid Crystals投稿8个月没有信息 +4 书剑如风 2024-12-17 12/600 2024-12-20 04:40 by 胖胖的大海
[公派出国] 意大利帕多瓦大学招收CSC博士生--光电催化材料在新能源及可持续绿色化学方向 +3 huangyuxing2 2024-12-16 3/150 2024-12-17 18:25 by zhizhan127
信息提示
请填处理意见