应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 请问血清RNA怎样提取？又怎样验证已提取出血清RNA？
201/2返回列表12下一页
查看: 4445  |  回复: 19
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

xan36

新虫 (小有名气)

[求助] 请问血清RNA怎样提取？又怎样验证已提取出血清RNA？ 已有7人参与

如题：请问血清RNA怎样提取？又怎样验证已提取出血清RNA？
谢谢！！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
风雨后的阳光更珍贵
1楼 2011-11-17 15:43:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

longrna

新虫 (正式写手)
★ ★
wanhscn(金币+2): good!鼓励交流! 2011-11-19 18:31:46
人血液（全血，也就医学上说的外周血）中RNA的含量很低，1ml一般在3ug左右（1-7ug）。一般是处理抗凝血液。
像以上全血的RNA提取有两种思路：
1）直接处理抗凝的全血，即加入如Trizol的裂解液直接往下做。此方法有个缺点：处理的体积血液体积有限，一般1ml Trizol处理100ul血液，最多不超过200ul.
2) 先去除血液中的红细胞分离出其中的白细胞（即淋巴细胞），然后提取白细胞的RNA。此方法的缺点：只能提取得到淋巴细胞的RNA，血液中游离的如病毒RNA无法提得。

你的血清是直接离心分离的吗?  如果只是做PCR，估计你直接弄200ul加Trizol提取就可以了。如果不行再从长计议。。。


血液是很复杂的。。。
赞一下(2人) 回复此楼
伟大航线....
4楼2011-11-18 09:52:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西湖鸟

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

血清RNA含量低，可以用TRIZOL，过程有点麻烦，氯仿毒性较大，我们实验室目前用的是BIOG血清提取试剂，效果与TRIZOL差不多。
赞一下(1人) 回复此楼
18楼2018-12-03 23:18:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

longrna

新虫 (正式写手)
有多大体积的血清？什么物种？提到后续实验做什么？要多少ng RNA？有什么特殊要求？
赞一下 回复此楼
伟大航线....
2楼2011-11-17 16:12:26
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xan36

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by longrna at 2011-11-17 16:12:26:
有多大体积的血清？什么物种？提到后续实验做什么？要多少ng RNA？有什么特殊要求？

有1ml左右的血清，是正常人的，想验证下血清中有没有我所要的目的基因，想提出来后做个PCR，要求的话符合PCR扩增的要求就可
谢谢！
赞一下 回复此楼
风雨后的阳光更珍贵
3楼2011-11-18 08:32:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xan36

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by longrna at 2011-11-18 09:52:38:
人血液（全血，也就医学上说的外周血）中RNA的含量很低，1ml一般在3ug左右（1-7ug）。一般是处理抗凝血液。
像以上全血的RNA提取有两种思路：
1）直接处理抗凝的全血，即加入如Trizol的裂解液直接往下做。此方法 ...

谢谢您的回复！
我现在是想提出血清中的RNA，也就是外周血经过离心后的上清。
我现在想看下我的目的基因是否在血清中也存在，我用Trizol提取了血清中的RNA，但是不知道是否提出来，怎样检测已经提出血清中的RNA?比如用一种内参，但是好像b-actin不行，因为血清中没有b-actin
赞一下 回复此楼
风雨后的阳光更珍贵
5楼2011-11-18 10:01:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

匿名

用户注销 (正式写手)
xan36(金币+2): 谢谢回复 2011-11-19 08:36:45
本帖仅楼主可见
赞一下
6楼2011-11-18 10:52:11
已阅   申请MolEPI   回复此楼   编辑   查看我的主页

空谷幽风

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

xan36(金币+2): 谢谢回复！ 2011-11-19 08:36:59
很多公司有RNA的提取试剂盒，可以从血清里面提出RNA，不过量不会太多。质量可以用nadodrop或者分光光度计来测，建议用 nanodrop
赞一下 回复此楼
a?,c??ae~?a,EURc§?c?μé-,cs,,a‘?é?“i1/4?i1/4?i1/4?i1/4?
7楼2011-11-18 12:31:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dragoner

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

可以跑电泳啊，或者做real-time PCR
赞一下 回复此楼
8楼2011-11-19 17:33:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

longrna

新虫 (正式写手)
★
wanhscn(金币+1): 鼓励交流 2011-11-21 09:02:26
老实说，1ml的血清 提RNA不好做。。。
产量估计不到1ug，全跑电泳估计勉强可以看得见吧....
不是很理解LZ所说的验证已提取RNA是指什么验证。是指此提取方法行不行得通还是说你怀疑自己的操作？
LZ提出RNA要怎么处置她啊？不妨就以那个来验证呗
赞一下(1人) 回复此楼
伟大航线....
9楼2011-11-19 21:24:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xan36

新虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by longrna at 2011-11-19 21:24:10:
老实说，1ml的血清 提RNA不好做。。。
产量估计不到1ug，全跑电泳估计勉强可以看得见吧....
不是很理解LZ所说的验证已提取RNA是指什么验证。是指此提取方法行不行得通还是说你怀疑自己的操作？
LZ提出RNA要怎么 ...

谢谢回复~
我是想验证下血清中有没有我所检测的目的基因。
因为血清中RNA含量肯定很微量，而且现在通过扩增的结果是阴性的，为了排除并不是血清中不存在我的基因而不是RNA根本没有提取出来，我想验证下RNA是否成功提取。
赞一下 回复此楼
风雨后的阳光更珍贵
10楼2011-11-20 09:36:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 xan36 的主题更新
201/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 2027广东省杰青 +3 奶牛小黑 2026-08-15 5/250 2026-08-16 18:38 by lxmichacl
[基金申请] 哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜？ +9 Ldrop2023 2026-08-13 9/450 2026-08-16 13:24 by wukun_007
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +32 医学老男孩 2026-08-13 72/3600 2026-08-16 13:15 by 医学老男孩
[基金申请] 咱们一起用铁证分析2026国家社科基金中标与否 +7 启萌科技 2026-08-12 26/1300 2026-08-16 12:35 by 启萌科技
[基金申请] 有时候，自然基金真的不能太认真 （我的申报经验） +10 majunge000 2026-08-11 12/600 2026-08-16 08:18 by xli1984
[基金申请] filecode=后面第一个是大写字母 +6 wangze12014 2026-08-14 7/350 2026-08-15 20:12 by gltch
[基金申请] filecode +8 cratir 2026-08-14 12/600 2026-08-15 18:08 by zyfgau
[基金申请] 各位道友，我要去昆明玩几天，回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
[基金申请] 奇怪，两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +8 布布和一二 2026-08-10 11/550 2026-08-14 14:58 by Equinoxhua
[硕博家园] 读博的好处 +4 lnee 2026-08-11 4/200 2026-08-14 10:20 by ahsoarli
[基金申请] filecode +15 documentary 2026-08-10 17/850 2026-08-14 10:08 by kissu88
[基金申请] FileCode能看出啥？ +10 要乐观耀哥 2026-08-10 32/1600 2026-08-14 09:37 by 要乐观耀哥
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见，大家看看几个A，几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 综述论文作为代表作会不会影响评审专家的印象分？ +11 yufeiwaner 2026-08-09 13/650 2026-08-12 08:17 by yufeiwaner
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 为什么网上很多人说本周 12号出结果 +6 瞬息宇宙 2026-08-10 7/350 2026-08-11 19:25 by Tide man
[基金申请] 什么时候出结果，有咨询渠道？？？ +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 确定了，国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭