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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 请教一下pcr扩出的这到底对不对啊?
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XUMIN6891

金虫 (初入文坛)

[求助] 请教一下pcr扩出的这到底对不对啊?

各位高人请指导小妹一下，我要扩出的片段大小是357bp，我用的2000bp的Market，按说我跑出的条带应该在250bp-500bp之间就对，但是我一直扩出来的在250bp以上一点点，这是不是就不对啊，因为我用另外一对引物扩出的片段也是357bp，他跑出来条带就在250bp-500bp之间。所以我一直觉得我扩出来的不对，有谁遇见过这种情况吗？指导指导一下吧！真郁闷，做好长时间了梯度降落PCR都用了结果就是没出来！郁闷！
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1楼 2011-11-09 21:06:36
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XUMIN6891

金虫 (初入文坛)
明天吧，我把图片拷一个传上去，然后再让你们帮我看看，谢谢了！
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4楼2011-11-09 22:28:17
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wanglei512

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

首先你要排除这不是引物二聚体，
这个不能说是不对，marker不一定准确，你可以直接送PCR产物去测序，或者链到pGEM-Teasy 载体上进行测序，根据测序结果判断。
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2楼2011-11-09 22:22:57
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wanglei512

金虫 (正式写手)
我估计你这是正确的，应该没问题，可以的话把你图片传上来
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3楼2011-11-09 22:24:24
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snzydong

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

应该没有问题 marker不见得准 只要比250bp大 应该就不是引物二聚体 你应该回收以后去测序看看
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5楼2011-11-10 08:49:07
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