24小时热门版块排行榜    

查看: 808  |  回复: 3
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

zynmyz

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于蛋白表达的问题

我的目的片段1600多bp 重组质粒也正确 通用引物和交叉PCR均验证过 没问题 测序结果也正确 就是不出蛋白电泳带 请问为什么  IPTG 0.1 0.5 都用过了 温度从15到37都试过了 都不出条带 不知道为什么 请哪位大侠级人物赐教
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zynmyz

新虫 (初入文坛)


wanhscn(金币+1): 鼓励多去应助回帖,有奖励! 2011-11-02 11:57:47
引用回帖:
2楼: Originally posted by 蚊在江湖 at 2011-11-01 14:56:36:
1.看看目的片段中有没有稀有密码子串联

2. 换载体

3.换宿主

4.融合表达还是包涵体表达

首先感谢您赐予的宝贵意见 是这样 我也考虑到了稀有密码子的事了  通过评测的确有一个位置发生了串联,其它的都是分散出现的 是两个密码子紧挨着。载体换过了分别是PET-30a和PGEX6P-2都不行 至于宿主菌我用的BL-21 我们没有别的了 文献上说是包涵体表达 请问哪位高人有ROSSETA菌 可以给我点吗 或者交换 谢谢了
3楼2011-11-02 00:50:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 4 个回答

蚊在江湖

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
西瓜(金币+4): Good! 2011-11-01 17:39:29
1.看看目的片段中有没有稀有密码子串联

2. 换载体

3.换宿主

4.融合表达还是包涵体表达
2楼2011-11-01 14:56:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liufeifeia

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

我之前也是哪里都对就是不表达,隔了一段时间,又转了一次,IPTG浓度1, 25度,结果就出来了。
4楼2011-11-03 14:38:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求调剂院校信息 +4 CX 330 2026-03-21 4/200 2026-03-21 23:48 by ms629
[考研] 269专硕求调剂 +5 金恩贝 2026-03-21 5/250 2026-03-21 22:37 by zhyzzh
[考研] 材料学硕301分求调剂 +7 Liyouyumairs 2026-03-21 7/350 2026-03-21 22:31 by peike
[考研] 考研调剂 +3 呼呼?~+123456 2026-03-21 3/150 2026-03-21 20:04 by 无际的草原
[考研] 一志愿东华大学控制学硕320求调剂 +3 Grand777 2026-03-21 3/150 2026-03-21 19:23 by 简之-
[考研] 0703化学调剂 ,六级已过,有科研经历 +14 曦熙兮 2026-03-15 14/700 2026-03-21 19:12 by ColorlessPI
[考研] 297求调剂 +3 喜欢还是不甘心 2026-03-20 3/150 2026-03-21 18:33 by 学员8dgXkO
[考研] 278求调剂 +9 烟火先于春 2026-03-17 9/450 2026-03-21 17:47 by 学员8dgXkO
[考研] 311求调剂 +3 勇敢的小吴 2026-03-20 3/150 2026-03-21 17:40 by ColorlessPI
[基金申请] 学校已经提交到NSFC,还能修改吗? 40+4 babangida 2026-03-19 9/450 2026-03-21 16:12 by babangida
[考研] 306求调剂 +4 chuanzhu川烛 2026-03-18 4/200 2026-03-21 08:25 by laoshidan
[考研] 301求调剂 +10 yy要上岸呀 2026-03-17 10/500 2026-03-21 03:14 by JourneyLucky
[考研] 材料专业求调剂 +6 hanamiko 2026-03-18 6/300 2026-03-21 00:24 by JourneyLucky
[考研] 一志愿 南京航空航天大学大学 ,080500材料科学与工程学硕 +5 @taotao 2026-03-20 5/250 2026-03-20 20:16 by JourneyLucky
[考研] 261求B区调剂,科研经历丰富 +3 牛奶很忙 2026-03-20 4/200 2026-03-20 19:34 by JourneyLucky
[考研] 环境工程调剂 +9 大可digkids 2026-03-16 9/450 2026-03-20 17:38 by 醉在风里
[考研] 一志愿福大288有机化学,求调剂 +3 小木虫200408204 2026-03-18 3/150 2026-03-19 13:31 by houyaoxu
[考研] 085601专硕,总分342求调剂,地区不限 +5 share_joy 2026-03-16 5/250 2026-03-18 14:48 by haxia
[考博] 26申博 +4 八6八68 2026-03-16 4/200 2026-03-17 13:00 by 轻松不少随
[考研] 085601材料工程315分求调剂 +3 yang_0104 2026-03-15 3/150 2026-03-15 10:58 by peike
信息提示
请填处理意见