24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 1738  |  回复: 10
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

静海

新虫 (小有名气)

[求助] 做限制性酶切,请帮忙分析下

第一次做限制性酶切,请大家帮忙分析下(*^__^*) 嘻嘻……
marker是5000。载体是3号是我的条带。我想教一下,
1.我的有4条带,从离加样孔最近的是不是依次为:载体、空载体、目的基因、杂质?
2.理想的情况是3条带么?跑的最慢的那条是未切的载体,亮度较小。其次是空载体和目的基因条带,亮度较大且二者相近。
3.从亮度来看,1、3条带和2、4、5有较大区别,是因为?
4.怎么改进呢?最大的问题是?
O(∩_∩)O谢谢~~~

限制酶切电泳图

[ Last edited by 1949stone on 2011-10-31 at 21:51 ]
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dream-fish

银虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 静海 at 2011-11-06 15:29:22:
好受打击啊,做这个是想做个验证~~我现在刚开始接触,还是不太明白~~

这个可能是因为你基因内部有你用的酶的位点。用软件先认真分析下,或者把T载体送测序。
9楼2011-11-16 14:40:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答

jingdejun

铁杆木虫 (小有名气)

我觉得你应该把每个泳道对应点的样品是什么,要说清楚。
不然不好分析。
2楼2011-11-01 12:59:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

分子生物化学

金虫 (小有名气)

实验菜鸟

【答案】应助回帖


西瓜(金币+1): 欢迎交流 2011-11-01 17:56:40
限制性内切酶在最佳环境在可以只切单一酶切位点,但是如果环境不适宜,它也有可能去切其他限制性内切酶的酶切位点,我估计你酶切条件不对,请参照酶的说明书改一下酶切条件。
做实验有失败才能学到东西
3楼2011-11-01 15:58:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

静海

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by jingdejun at 2011-11-01 12:59:08:
我觉得你应该把每个泳道对应点的样品是什么,要说清楚。
不然不好分析。

做的是公共实验,只有3号的加样孔是我的样。质粒是pMD19-T。用的两种限制性酶:HindIII、EcoRI.
4楼2011-11-02 19:55:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 化工求调剂! +32 RichLi_ 2026-04-06 32/1600 2026-04-09 19:50 by may_新宇
[考研] 291分调剂 +3 上岸小莹加油 2026-04-09 4/200 2026-04-09 17:28 by 1753564080
[考研] 085600材料与化工专硕329 求调剂 +24 额cc 2026-04-06 25/1250 2026-04-09 16:01 by wp06
[考研] 材料调剂 +14 一样YWY 2026-04-06 14/700 2026-04-08 23:00 by 猪会飞
[考研] 331求调剂 +5 luoxin0706. 2026-04-08 5/250 2026-04-08 22:15 by zhouyuwinner
[考研] 285求调剂 +12 AZMK 2026-04-05 18/900 2026-04-08 20:43 by 逆水乘风
[考研] 264求调剂 +11 麦小叮当 2026-04-07 11/550 2026-04-08 16:05 by 一只好果子?
[考研] 325 调剂 +6 QQ小虾 2026-04-07 6/300 2026-04-07 15:17 by Ccclqqq
[考研] 081700学硕,323分,一志愿中国海洋大学求调剂学校 +19 披星河 2026-04-04 19/950 2026-04-07 15:00 by 上岸快快
[考研] 295求调剂 +18 xndjjj 2026-04-04 19/950 2026-04-07 11:02 by wangjy2002
[考研] 考研调剂 +7 15615482637 2026-04-04 7/350 2026-04-06 22:56 by chenzhimin
[考研] 08600生物与医药-327 +9 18755400796 2026-04-05 9/450 2026-04-06 22:35 by 52305043001
[考研] 生物学求调剂 +5 15064154688 2026-04-03 5/250 2026-04-06 11:56 by lijunpoly
[考研] 341求调剂 +3 学无止境,冲 2026-04-05 3/150 2026-04-05 09:40 by lbsjt
[考研] 一志愿郑大0705求调剂 +3 橘十一 2026-04-02 4/200 2026-04-05 00:05 by chongya
[考研] 一志愿东北大学085901土木专硕345求调剂 +3 zxt11111 2026-04-04 3/150 2026-04-04 14:21 by 土木硕士招生
[考研] 本9一志愿2 0854低分专硕286求调剂 +9 芒种111 2026-04-04 9/450 2026-04-04 11:01 by tangruihua
[考研] 考研调剂 +3 Draa 2026-04-03 3/150 2026-04-03 17:37 by hgwz7468
[考研] 085501一志愿天工大,机械专硕求调剂,跨材料 +3 33上 2026-04-03 3/150 2026-04-03 14:08 by 1753564080
[考研] 一志愿安徽大学0817化学工程与技术,求调剂 +14 我不是只因 2026-04-02 15/750 2026-04-03 09:49 by 蓝云思雨
信息提示
请填处理意见