24小时热门版块排行榜    

查看: 1609  |  回复: 10
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

静海

新虫 (小有名气)

[求助] 做限制性酶切,请帮忙分析下

第一次做限制性酶切,请大家帮忙分析下(*^__^*) 嘻嘻……
marker是5000。载体是3号是我的条带。我想教一下,
1.我的有4条带,从离加样孔最近的是不是依次为:载体、空载体、目的基因、杂质?
2.理想的情况是3条带么?跑的最慢的那条是未切的载体,亮度较小。其次是空载体和目的基因条带,亮度较大且二者相近。
3.从亮度来看,1、3条带和2、4、5有较大区别,是因为?
4.怎么改进呢?最大的问题是?
O(∩_∩)O谢谢~~~

限制酶切电泳图

[ Last edited by 1949stone on 2011-10-31 at 21:51 ]
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dream-fish

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

静海(金币+1): 2011-11-16 00:49:17
你做的是双酶切,那么我就理解为你是打算做了酶切之后连接到其他载体上面去。但是你的空载体是什么呢?如果也是pmd18-T那么,我认为你的酶切是完全失败的。T载体是不会切出三条带的。一般做双酶切,就是两条带。
7楼2011-11-03 13:06:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dream-fish

银虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 静海 at 2011-11-06 15:29:22:
好受打击啊,做这个是想做个验证~~我现在刚开始接触,还是不太明白~~

这个可能是因为你基因内部有你用的酶的位点。用软件先认真分析下,或者把T载体送测序。
9楼2011-11-16 14:40:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 静海 的主题更新
信息提示
请填处理意见