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如来的观音

金虫 (小有名气)

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虫号: 1374180

[交流] 不解的问题，q-PCR结果分析。

RT-pcr的数据分析（2-deltadeltaCT法）是建立在假设目的基因和内参基因的扩增效率大概一致的前提下，并且在95-110%之间合适，那怎样才能确保扩增效率呢？难道每次上机前都要做标准曲线计算扩增效率吗，或者所有试验只做一次标准曲线计算扩增效率用在所有的后续试验中？
谢谢

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1楼 2011-10-28 11:05:38

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

西瓜

荣誉版主 (知名作家)

★
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引用回帖:

6楼: Originally posted by 如来的观音 at 2011-10-29 00:13:47:
好像我们实验室这边从来不做标准曲线确定扩增效率，但我总觉得不妥，发好点的文章需要说明扩效率吗，或者说你们实验室都是一般一对引物做一次标准曲线确定扩增效率吗，这对发文章有影响吗？谢谢

发文章一般不需要扩增效率的数据，直接上最后定量的结果就可以了。不过建议你至少测一次扩增效率，毕竟，扩增效率差太多，定量结果就不可靠啦。