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513279618

银虫 (小有名气)

[求助] 质粒单酶切之后比原始质粒变小了!!!??

质粒分别单酶切之后,跑胶发现比原始质粒变小了!!如果是存在两个酶切位点,把质粒切成了两条相等的片段,但从分子量计算又不对。
可是如果进行双酶切,还能切下目的带。本人实在困惑。求各位高手指点!!!!
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lihegang2000

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

我估计你的胶浓度在1.5%以上,浓度越大,超螺旋的质粒跑得越慢
6楼2011-10-29 11:52:38
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yang0071

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
adslye(金币+2): 鼓励交流~ 2011-10-28 13:09:24
质粒跑胶会有3条带
即跑最前边的是超螺旋状态的质粒,中间的是螺旋状态的质粒,泳动速度最慢线型质粒DNA。
2楼2011-10-28 10:41:49
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gongeleven

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


amisking(金币+1): 鼓励发帖交流! 2011-10-28 19:15:48
质粒电泳的大小没参考价值,不用管,一般看质粒大小都是单酶切线性化后

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
3楼2011-10-28 11:23:31
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amilie030312

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


amisking(金币+1): 鼓励发帖交流! 2011-10-28 19:15:55
同上,质粒的电泳大小看看就行了,线性化质粒电泳结果可能还有些参考价值。
4楼2011-10-28 13:18:15
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