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addictedfish

铁虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 28.5
散金: 10
帖子: 23
在线: 50.9小时
虫号: 1379236
注册: 2011-08-25
专业: 作物分子育种

[求助] 急救啊！各位大虾，PCR扩基因有杂带(有图)！

大家好！我是实验菜鸟，从油菜基因组直接P基因。都快一个月了，天天作重复工作，该考虑都考虑了，但是就是扩不出来东西。。现就把PCR体系和反应程序列出来。请各位大虾们多多指教啊？
      体系：10 x buffer          2.5ul，
         dNTP (2.5mM each)  3ul,
                     25mM Mg+          2ul ,
                     上下引物各    1ul,
                  基因组DNA             3ul,
               2.5U/ul Taq酶       0.4ul
               加水至25ul

反应程序： 94 3min
               94 30s
               52 1mim
               72 2min  共 32个循环。
         72    3min
            这是我做的最好的一次，我要上面的带，但是下面的非特异性带更亮啊？大家帮我看看。

图

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