应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » PCR成这样，求助！！！
51/1返回列表
查看: 1206  |  回复: 11
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

木左左

银虫 (正式写手)

[求助] PCR成这样，求助！！！

公司做的cDNA，引物，然后是体系，程序自己做的，cDNA公司有没有用内参检测我也不清楚，电泳图下面有，引物一的Tm值64.13，二的Tm值63.95，目的片段GC含量高可以到60%，目的片段出多2300多bp，体系：buffer2.5mg2.0dntp2.0引物0.5酶0.3cDNA1.5和0.5两个，程序95度10分钟，94度45秒，63.5度45秒，72度90秒，15个循环；94度45秒，58.5度45秒72度45秒20个循环，72度10分钟。大家给建议，看看我怎么修改体系和程序，才能有可能扩出目的片段！谢谢

2000马克
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-10-21 11:06:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

木左左

银虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by jurkat.1640 at 2011-10-21 22:48:54:
72℃，2 min。不能少于1.5 min。
退火30 s就够了。

你说的72度2min是指延伸时还是指最后一步啊！
赞一下 回复此楼
5楼2011-10-22 12:02:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答

木左左

银虫 (正式写手)
还麻烦大家给我分析下我的图
赞一下 回复此楼
2楼2011-10-21 11:07:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★ ★
adslye(金币+2): 感谢交流！ 2011-10-23 15:13:16
木左左(金币+1): 2011-11-12 22:40:39
72℃，2 min。不能少于1.5 min。
退火30 s就够了。
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2011-10-21 22:48:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

木左左

银虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by jurkat.1640 at 2011-10-21 22:48:54:
72℃，2 min。不能少于1.5 min。
退火30 s就够了。

谢谢啊
回复此楼
4楼2011-10-22 10:35:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭