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pidou213

木虫 (正式写手)

[求助] 毕赤酵母表达

毕赤酵母表达中
1\ 要求开始表达之前的起始浓度是OD600=1.0.请问这个浓度对其表达的影响到底有多大?
2\在我表达过程中,我发现酵母的浓度仅需要24h就已经很浓很浓了,是否还需要稀释呢?
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见得多爱的多
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2楼2011-10-15 00:14:56
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ruth_3912834

铜虫 (小有名气)

路过,学习
3楼2011-10-15 09:00:57
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黎明星01

新虫 (初入文坛)

飘过,不过顶一下!
4楼2011-10-15 10:15:15
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pidou213

木虫 (正式写手)

貌似没有人会哦
见得多爱的多
5楼2011-10-19 12:10:37
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pidou213

木虫 (正式写手)


wanhscn(金币+1): 如果没人发,金币可申请返还! 2011-11-08 09:02:41
没有人回复,让我这金币如何发啊???
见得多爱的多
6楼2011-10-30 00:37:33
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wt3532

木虫 (著名写手)

涛声依旧

【答案】应助回帖

★ ★
pidou213(金币+3): 2011-10-31 12:10:01
西瓜(金币+2): 鼓励应助 2011-11-01 17:44:05
这个应该1.0左右即可,即酵母繁殖到一定程度,有一定数量,不至于添加甲醇后表达蛋白而细胞不生在繁殖了。
24h后为什么需要稀释,感觉没必要。
7楼2011-10-30 02:10:30
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pidou213

木虫 (正式写手)

引用回帖:
7楼: Originally posted by wt3532 at 2011-10-30 02:10:30:
这个应该1.0左右即可,即酵母繁殖到一定程度,有一定数量,不至于添加甲醇后表达蛋白而细胞不生在繁殖了。
24h后为什么需要稀释,感觉没必要。

那如果 超过了指数生长期(OD600=2-6),此时的酵母菌还可以稀释到OD1.0用来做诱导表达吗?
见得多爱的多
8楼2011-10-31 12:09:54
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jingdejun

铁杆木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
西瓜(金币+3, MolEPI+1): Good!一起奖励! 2011-11-01 17:44:51
pidou213(金币+2): 劳烦再回答一下 2011-11-04 17:12:10
引用回帖:
8楼: Originally posted by pidou213 at 2011-10-31 12:09:54:
那如果 超过了指数生长期(OD600=2-6),此时的酵母菌还可以稀释到OD1.0用来做诱导表达吗?

当然不能稀释啦!!你稀释之后虽然OD值是变回来了,但是里面的菌所处的生长时期又不会变!!

或者你用培养基稀释到更小的OD,再培养到所需的OD,这种方法或许还可以。
但是最好还是重新培养吧。重新接种也不是很麻烦啊,只是下次要注意培养时间咯。。
9楼2011-11-01 14:25:12
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pidou213

木虫 (正式写手)

引用回帖:
9楼: Originally posted by jingdejun at 2011-11-01 14:25:12:
当然不能稀释啦!!你稀释之后虽然OD值是变回来了,但是里面的菌所处的生长时期又不会变!!

或者你用培养基稀释到更小的OD,再培养到所需的OD,这种方法或许还可以。
但是最好还是重新培养吧。重新接种也不 ...

请问你们用什么方法稀释到OD=1.0呢 毕竟感觉操作起来 好麻烦啊  并且还容意污染
所以想请叫 你们是怎么做的呢 ?、能详细描述一下吗? 谢谢啊
见得多爱的多
10楼2011-11-04 17:13:27
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