应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 我的PCR电泳图怎么这样的啊。。。
51/1返回列表
查看: 3530  |  回复: 11
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

树宝宝zyx

新虫 (小有名气)

[求助] 我的PCR电泳图怎么这样的啊。。。

我用的是底泥提取出来的DNA，其260/280,260/230达到1.8,1.9的样子，应该还不错。我选用的引物是16SrDNA V3区的通用引物，27F和1495R。PCR条件是参考文献的，采用降落式。为什么电泳图会变成这样呢。自右手边起第一个是Marker，第二个是空白，而且我每次做的空白经常会有条带出现，做了好多次总是不能出现满意的结果，很着急。请各位不吝赐教，先谢谢了。

PCR电泳图
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
科研真辛苦！
1楼 2011-10-13 10:26:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shrimp5555

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

是你的DNA出问题啦？对了，跑胶的时候电压不要太大啊，不然就会出现拖尾的
赞一下 回复此楼
大大傻气加上少少耍流氓
4楼2011-10-13 11:09:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答

asznpb

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
amisking(金币+2): 鼓励发帖交流！ 2011-10-13 19:46:12
1,方向反了，一般习惯都是胶孔在上面
2，从你的marker来看，应该是电泳除了问题
建议更换新的电泳液，重新做胶（琼脂糖浓度高一些，胶硬一些），还有就是降低电压重新跑
赞一下(2人) 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

树宝宝zyx
显微镜下的世界很精彩！
2楼2011-10-13 11:04:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

asznpb

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

树宝宝zyx(金币+2): 2011-10-13 16:20:59
空白出条带，请问是怎么设置的空白？只有水？还是除了底物之外都加了？如果是后者的话可能是引物二聚体，或者是别的东西有DNA污染了，如果是前者，那就神奇了……
赞一下 回复此楼
显微镜下的世界很精彩！
3楼2011-10-13 11:06:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

另一个天堂

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
wanhscn(金币+2): 鼓励应助！ 2011-10-13 12:28:28
树宝宝zyx(金币+2): 2011-10-13 16:20:39
1.空白也有条带，应该是交叉污染了。
2.你的PCR条带不清晰，是不是pcr没扩好？重新做一次（确保加样正确），还是不行的话就换PCR条件，可以自己摸索。一般是
                      95度     5min
                      {95        30s
                    55-57      30s（看你自己的引物）
                     72          1min（看你的DNA大小，一般1kb/min）}  
                      25-35个循环
                      72度     7min
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2011-10-13 11:55:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭