| 查看: 4324 | 回复: 17 | |||
| 本帖产生 1 个 BioEPI ，点击这里进行查看 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[交流]
求助：纯化蛋白遇到包涵体了，尿素怎么用？
|
|||
|
纯化大肠杆菌重组蛋白，遇到包涵体了，超声裂解不能澄清，离心后蛋白全在菌体沉淀里面 低温诱导貌似没什么效果。。。。。。请问大家用什么方法释放出来包涵体呢？ 有人用8M尿素处理超声成功破裂包涵体 我的问题是，8M的尿素怎么去掉呢？我们的蛋白是GST标签的，是打算用GST琼脂糖柱子纯化的。。。。我不知道8M的尿素对柱子有没有什么影响呢？ |
回复此楼» 本帖已获得的红花（最新10朵）
花生剥了壳» 猜你喜欢
学硕274求调剂
已经有11人回复
-
一志愿郑大材料工程290求调剂
已经有12人回复
-
环境工程 085701，267求调剂
已经有8人回复
-
083000学硕274求调剂
已经有10人回复
-
一志愿085600中科院宁波所276分求调剂
已经有4人回复
-
材料专业申博
已经有3人回复
-
307求调剂
已经有20人回复
-
285求调剂
已经有8人回复
-
材料与化工（0856）304求B区调剂
已经有8人回复
-
370求调剂
已经有3人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 蛋白包涵体透析后杂蛋白很多，请教原因
已经有10人回复
- 包涵体洗涤后8M尿素不溶解
已经有7人回复
- 【求助】包涵体表达与可溶性表达
已经有6人回复
- 【求助/交流】急！如何分离未彻底破碎的细胞及包涵体？
已经有7人回复
- 【求助/交流】关于millpore超滤离心管
已经有8人回复
- 【求助/交流】如何制备干净的包涵体
已经有10人回复
- 【求助/交流】原核表达蛋白纯化
已经有29人回复
» 抢金币啦！回帖就可以得到:
-
南方科技大学纳米-飞秒-超快动力学课题组---诚聘博士后/助理研究员
+1/185
-
西南科大辐射防护材料课题组接收材料与化学背景硕士研究生
+3/89
-
太原科技大学材料科学与工程学院招收金属材料类博士一名
+1/82
-
接工学跨专业调剂学生，非诚勿扰，谢谢
+1/48
-
福建师范大学海峡柔性电子学院招收2026级调剂硕士研究生（化学/物理学/材料工程）
+1/40
-
大连工业大学 高分子材料 接收考研调剂
+1/39
-
新疆碳纳米材料制备与应用重点实验室2026年招聘启事
+1/39
-
2026 年山东建筑大学金属增材制造方向硕士研究生调剂公告
+1/38
-
南京信息工程大学 化材院接受调剂研究生
+1/36
-
浙江省人民医院博士后岗位招聘
+1/35
-
环境化学、地学、环境毒理方向，擅长污染物迁移转化降解、分析检测、计算模拟者优先
+1/32
-
招收2026专业代码08开头学术型硕士研究生
+1/11
-
烟台大学精准材料高等研究院26年材料方向研究生招生
+1/8
-
湖北师范大学招调剂啦
+1/7
-
博士招生 | 青岛科技大学（高分子、化学、材料、力学、机电工程、计算机仿真）
+1/6
-
2026年中国科学院城市环境所与福建农林大学联合培养硕士研究生项目介绍
+1/6
-
同济大学环境学院 肖倩特聘研究员课题组 招聘硕士/博士（长期有效）
+1/4
-
2026年-教育部重点实验室招收化学、材料、机械、智能制造、人工智能等相关方向研究生
+1/3
-
长江师范学院化学工程方向接收大量调剂考生
+1/2
-
2026年北京石油化工学院环境学科-水污染控制工程方向课题组欢迎您
+1/2
复性的过程太费时间了 
6楼2011-10-04 22:43:30
btx362237729(金币+3): 非常感谢 2011-10-04 13:36:46
amisking(BioEPI+1): 鼓励应助。 2011-10-04 18:51:24
amisking(BioEPI+1): 鼓励应助。 2011-10-04 18:51:24
|
上柱之前先进行包涵体的复性 （1）将溶解的包涵体装入已经处理好的透析袋中，封好口，。 （2）放于4℃复性缓冲液中进行梯度复性，间隔时间为10-12h，复性缓冲液的浓度分别为：4.5mmol/L、3.5mmol/L、2.5mmol/L、1.5mmol/L、0.5mmol/L、0mmol/L。 （3）取出复性后的蛋白溶液12000rpm离心20min，取上清，分别取少量的上清和少许的沉淀进行SDS-PAGE，检测复性情况。 复性缓冲液：PBS 1mmol/LEDTA +尿素 |
2楼2011-10-04 13:16:47
3楼2011-10-04 13:17:59
4楼2011-10-04 13:30:32
