| 查看: 4226 | 回复: 17 | |||
| 本帖产生 1 个 BioEPI ，点击这里进行查看 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[交流]
求助：纯化蛋白遇到包涵体了，尿素怎么用？
|
|||
|
纯化大肠杆菌重组蛋白，遇到包涵体了，超声裂解不能澄清，离心后蛋白全在菌体沉淀里面 低温诱导貌似没什么效果。。。。。。请问大家用什么方法释放出来包涵体呢？ 有人用8M尿素处理超声成功破裂包涵体 我的问题是，8M的尿素怎么去掉呢？我们的蛋白是GST标签的，是打算用GST琼脂糖柱子纯化的。。。。我不知道8M的尿素对柱子有没有什么影响呢？ |
回复此楼» 本帖已获得的红花（最新10朵）
花生剥了壳» 猜你喜欢
求材料调剂
已经有7人回复
-
一志愿天大材料与化工（085600）总分338
已经有3人回复
-
085600材料与化工
已经有5人回复
-
085600材料与化工调剂 324分
已经有6人回复
-
286求调剂
已经有9人回复
-
焦虑
已经有12人回复
-
344求调剂
已经有6人回复
-
266求调剂
已经有9人回复
-
化学工程321分求调剂
已经有18人回复
-
314求调剂
已经有8人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 蛋白包涵体透析后杂蛋白很多，请教原因
已经有10人回复
- 包涵体洗涤后8M尿素不溶解
已经有7人回复
- 【求助】包涵体表达与可溶性表达
已经有6人回复
- 【求助/交流】急！如何分离未彻底破碎的细胞及包涵体？
已经有7人回复
- 【求助/交流】关于millpore超滤离心管
已经有8人回复
- 【求助/交流】如何制备干净的包涵体
已经有10人回复
- 【求助/交流】原核表达蛋白纯化
已经有29人回复
» 抢金币啦！回帖就可以得到:
-
2026年国基求好运！
+5/500
-
湘潭大学化工学院国家级人才团队2026年博士研究生招生
+1/65
-
飘在美国，有点想家
+1/63
-
0854电子信息调剂，闽南师大光电芯片研发实验室，柯少颖教授课题组，集成电路
+1/44
-
1
+1/37
-
2026年重庆工商大学管理科学与工程专业学术硕士招生调剂，风景总在柳暗花明处
+1/36
-
湘潭大学“过程强化与绿色化工”创新团队补招2026年秋入学博士生
+1/35
-
湖北工业大学 生命科学与健康学院 课题组招收2026级食品/生物方向硕士
+1/35
-
北京航空航天大学招生微流控与智能打印技术方向博士研究生
+2/30
-
医学327分专硕调剂
+1/16
-
211/双一流---石河子大学---有机化学方向招调剂生
+1/16
-
北京某研究院生物化学与分子生物学相关专业申请考核制博士招生（春季）
+1/14
-
山东省植物基蛋白技术创新中心课题组联合培养硕士研究生招募启事
+1/12
-
【2026博士招生/博后招聘】北京航空航天大学潘彪课题组——AI芯片设计方向
+1/11
-
新加坡国立大学药学系化学生物学课题组招PhD
+1/10
-
新加坡国立大学药学系化学生物学课题组招PhD
+1/10
-
河南大学龚和贵教授2026年博士研究生招生
+1/9
-
“机械、材料”招生
+1/3
-
课题组招收环境及相关专业调剂硕士研究生（欢迎优秀学生加入）
+1/2
-
323分控制工程求调剂
+1/2
17楼2012-06-11 21:25:30
btx362237729(金币+3): 非常感谢 2011-10-04 13:36:46
amisking(BioEPI+1): 鼓励应助。 2011-10-04 18:51:24
amisking(BioEPI+1): 鼓励应助。 2011-10-04 18:51:24
|
上柱之前先进行包涵体的复性 （1）将溶解的包涵体装入已经处理好的透析袋中，封好口，。 （2）放于4℃复性缓冲液中进行梯度复性，间隔时间为10-12h，复性缓冲液的浓度分别为：4.5mmol/L、3.5mmol/L、2.5mmol/L、1.5mmol/L、0.5mmol/L、0mmol/L。 （3）取出复性后的蛋白溶液12000rpm离心20min，取上清，分别取少量的上清和少许的沉淀进行SDS-PAGE，检测复性情况。 复性缓冲液：PBS 1mmol/LEDTA +尿素 |
2楼2011-10-04 13:16:47
3楼2011-10-04 13:17:59
4楼2011-10-04 13:30:32
