| 查看: 4232 | 回复: 17 | |||
| 本帖产生 1 个 BioEPI ，点击这里进行查看 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[交流]
求助：纯化蛋白遇到包涵体了，尿素怎么用？
|
|||
|
纯化大肠杆菌重组蛋白，遇到包涵体了，超声裂解不能澄清，离心后蛋白全在菌体沉淀里面 低温诱导貌似没什么效果。。。。。。请问大家用什么方法释放出来包涵体呢？ 有人用8M尿素处理超声成功破裂包涵体 我的问题是，8M的尿素怎么去掉呢？我们的蛋白是GST标签的，是打算用GST琼脂糖柱子纯化的。。。。我不知道8M的尿素对柱子有没有什么影响呢？ |
回复此楼» 本帖已获得的红花（最新10朵）
花生剥了壳» 猜你喜欢
070303一志愿西北大学学硕310找调剂
已经有9人回复
-
0703化学调剂，求各位老师收留
已经有9人回复
-
0703化学调剂
已经有11人回复
-
0703化学 305求调剂
已经有3人回复
-
一志愿吉林大学材料学硕321求调剂
已经有5人回复
-
274求调剂
已经有3人回复
-
一志愿中海洋材料工程专硕330分求调剂
已经有3人回复
-
328求调剂，英语六级551，有科研经历
已经有9人回复
-
【同济软件】软件（085405）考研求调剂
已经有3人回复
-
267一志愿南京工业大学0817化工求调剂
已经有7人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 蛋白包涵体透析后杂蛋白很多，请教原因
已经有10人回复
- 包涵体洗涤后8M尿素不溶解
已经有7人回复
- 【求助】包涵体表达与可溶性表达
已经有6人回复
- 【求助/交流】急！如何分离未彻底破碎的细胞及包涵体？
已经有7人回复
- 【求助/交流】关于millpore超滤离心管
已经有8人回复
- 【求助/交流】如何制备干净的包涵体
已经有10人回复
- 【求助/交流】原核表达蛋白纯化
已经有29人回复
» 抢金币啦！回帖就可以得到:
-
中国科学院杭州医学研究-常皓研究员课题组博士后招聘
+1/290
-
电力全国重点实验室双一流A类长江学者团队招2026年全日制博士1名（4月3日截止）
+2/104
-
浙江农林大学招收调剂
+1/80
-
湘潭大学化工学院国家级人才团队2026年博士研究生招生
+1/64
-
0854电子信息调剂，闽南师大光电芯片研发实验室，柯少颖教授课题组，集成电路
+1/39
-
湘潭大学“过程强化与绿色化工”创新团队补招2026年秋入学博士生
+1/35
-
中国科学院杭州医学研究所覃江江课题组招聘博士后
+1/35
-
找工作经验求助
+1/32
-
南京理工大学2026级硕士生招生-张光普博导 &硕导
+2/26
-
报名通道开启啦！浙江中医药大学副校长团队招聘药学/生物信息学等方向高校教师7名(地�
+1/22
-
重庆文理学院化学与环境工程学院 2026 届硕士研究生调剂通知
+1/16
-
学术/专业硕士调剂——化学、资源与环境
+1/15
-
新加坡国立大学药学系化学生物学课题组招PhD
+1/8
-
中国科学院过程工程研究所助理研究员（正式职工）和博士后招聘启事
+1/5
-
镇江托尔化学有机合成研发岗位工作机会
+1/4
-
武汉轻工大学土木水利青椒硕导招调剂
+1/3
-
课题组招收环境及相关专业调剂硕士研究生（欢迎优秀学生加入）
+1/2
-
323分控制工程求调剂
+1/2
-
北京高校副校长团队招收机械类，环境类学硕和专硕
+1/2
-
085404 270求调剂，b区求导师收留接受跨专业
+1/1
12楼2012-04-27 19:11:10
btx362237729(金币+3): 非常感谢 2011-10-04 13:36:46
amisking(BioEPI+1): 鼓励应助。 2011-10-04 18:51:24
amisking(BioEPI+1): 鼓励应助。 2011-10-04 18:51:24
|
上柱之前先进行包涵体的复性 （1）将溶解的包涵体装入已经处理好的透析袋中，封好口，。 （2）放于4℃复性缓冲液中进行梯度复性，间隔时间为10-12h，复性缓冲液的浓度分别为：4.5mmol/L、3.5mmol/L、2.5mmol/L、1.5mmol/L、0.5mmol/L、0mmol/L。 （3）取出复性后的蛋白溶液12000rpm离心20min，取上清，分别取少量的上清和少许的沉淀进行SDS-PAGE，检测复性情况。 复性缓冲液：PBS 1mmol/LEDTA +尿素 |
2楼2011-10-04 13:16:47
3楼2011-10-04 13:17:59
4楼2011-10-04 13:30:32
