| 查看: 4227 | 回复: 17 | |||
| 本帖产生 1 个 BioEPI ，点击这里进行查看 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[交流]
求助：纯化蛋白遇到包涵体了，尿素怎么用？
|
|||
|
纯化大肠杆菌重组蛋白，遇到包涵体了，超声裂解不能澄清，离心后蛋白全在菌体沉淀里面 低温诱导貌似没什么效果。。。。。。请问大家用什么方法释放出来包涵体呢？ 有人用8M尿素处理超声成功破裂包涵体 我的问题是，8M的尿素怎么去掉呢？我们的蛋白是GST标签的，是打算用GST琼脂糖柱子纯化的。。。。我不知道8M的尿素对柱子有没有什么影响呢？ |
回复此楼» 本帖已获得的红花（最新10朵）
花生剥了壳» 猜你喜欢
求材料调剂
已经有7人回复
-
一志愿天大材料与化工（085600）总分338
已经有3人回复
-
085600材料与化工
已经有5人回复
-
085600材料与化工调剂 324分
已经有6人回复
-
286求调剂
已经有9人回复
-
焦虑
已经有12人回复
-
344求调剂
已经有6人回复
-
266求调剂
已经有9人回复
-
化学工程321分求调剂
已经有18人回复
-
314求调剂
已经有8人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 蛋白包涵体透析后杂蛋白很多，请教原因
已经有10人回复
- 包涵体洗涤后8M尿素不溶解
已经有7人回复
- 【求助】包涵体表达与可溶性表达
已经有6人回复
- 【求助/交流】急！如何分离未彻底破碎的细胞及包涵体？
已经有7人回复
- 【求助/交流】关于millpore超滤离心管
已经有8人回复
- 【求助/交流】如何制备干净的包涵体
已经有10人回复
- 【求助/交流】原核表达蛋白纯化
已经有29人回复
» 抢金币啦！回帖就可以得到:
-
西湖大学工学院智能微型机器人实验室博士后招聘启事
+4/228
-
物理学 调剂
+1/84
-
重庆医科大学神经科学中心/病生与生理系诚邀海内外优秀博士加盟博士后队伍（长期）
+1/81
-
物理学 调剂
+1/80
-
2026年重庆工商大学管理科学与工程专业学术硕士招生调剂，风景总在柳暗花明处
+1/36
-
关于碳量子点抗菌的研究
+1/35
-
湘潭大学“过程强化与绿色化工”创新团队补招2026年秋入学博士生
+1/35
-
青岛大学泰山学者课题组招2026年申请考核制博士
+1/33
-
中科院生态环境研究中心国重实验室招聘客座研究生1-2名
+1/31
-
北京航空航天大学招生微流控与智能打印技术方向博士研究生
+2/30
-
2026年西南科技大学功能涂层课题组简介
+1/11
-
中国民航飞行学院先进连接团队招收航空宇航、航空机械专业硕士研究生（学硕专硕均可）
+1/11
-
红外发射率测试（液体，2mm的小块体）/红外热成像发射率设定
+1/10
-
上海科技大学招收有机化学方向招收2026级工程博士
+1/6
-
福州大学国家级人才汤育欣教授课题组2026年招收”申请考核制“储能电池方向博士研究生
+1/6
-
【第三轮招生，31号截止】澳科大诚招2026秋全奖博士研究生（纳米医学/生物材料方向）
+1/5
-
“机械、材料”招生
+1/3
-
上海交通大学化学化工学院张智涛课题组诚聘博士后
+1/2
-
澳大利亚科学院院士Prof.Gordon Wallace, University of Wollongong 全奖博士机会
+1/1
-
北京大学环境学院张子帅研究员招收科研助理
+1/1
12楼2012-04-27 19:11:10
btx362237729(金币+3): 非常感谢 2011-10-04 13:36:46
amisking(BioEPI+1): 鼓励应助。 2011-10-04 18:51:24
amisking(BioEPI+1): 鼓励应助。 2011-10-04 18:51:24
|
上柱之前先进行包涵体的复性 （1）将溶解的包涵体装入已经处理好的透析袋中，封好口，。 （2）放于4℃复性缓冲液中进行梯度复性，间隔时间为10-12h，复性缓冲液的浓度分别为：4.5mmol/L、3.5mmol/L、2.5mmol/L、1.5mmol/L、0.5mmol/L、0mmol/L。 （3）取出复性后的蛋白溶液12000rpm离心20min，取上清，分别取少量的上清和少许的沉淀进行SDS-PAGE，检测复性情况。 复性缓冲液：PBS 1mmol/LEDTA +尿素 |
2楼2011-10-04 13:16:47
3楼2011-10-04 13:17:59
4楼2011-10-04 13:30:32
