| 查看: 4335 | 回复: 17 | |||
| 本帖产生 1 个 BioEPI ，点击这里进行查看 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[交流]
求助：纯化蛋白遇到包涵体了，尿素怎么用？
|
|||
|
纯化大肠杆菌重组蛋白，遇到包涵体了，超声裂解不能澄清，离心后蛋白全在菌体沉淀里面 低温诱导貌似没什么效果。。。。。。请问大家用什么方法释放出来包涵体呢？ 有人用8M尿素处理超声成功破裂包涵体 我的问题是，8M的尿素怎么去掉呢？我们的蛋白是GST标签的，是打算用GST琼脂糖柱子纯化的。。。。我不知道8M的尿素对柱子有没有什么影响呢？ |
回复此楼» 本帖已获得的红花（最新10朵）
花生剥了壳» 猜你喜欢
11408 321分求调剂
已经有4人回复
-
301求调剂
已经有12人回复
-
085801 总分275 本科新能源 求调剂
已经有9人回复
-
085600 295分求调剂
已经有17人回复
-
289求调剂
已经有23人回复
-
291求调剂
已经有23人回复
-
304求调剂
已经有15人回复
-
285求调剂
已经有11人回复
-
材料调剂
已经有11人回复
-
292分，材料与化工，申请调剂
已经有19人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 蛋白包涵体透析后杂蛋白很多，请教原因
已经有10人回复
- 包涵体洗涤后8M尿素不溶解
已经有7人回复
- 【求助】包涵体表达与可溶性表达
已经有6人回复
- 【求助/交流】急！如何分离未彻底破碎的细胞及包涵体？
已经有7人回复
- 【求助/交流】关于millpore超滤离心管
已经有8人回复
- 【求助/交流】如何制备干净的包涵体
已经有10人回复
- 【求助/交流】原核表达蛋白纯化
已经有29人回复
» 抢金币啦！回帖就可以得到:
-
欢迎调剂佛山大学资源与环境专业硕士
+2/188
-
【招聘】温州医科大学/附属医院/瓯江实验室李校堃院士团队诚聘博士后和科研人员
+2/183
-
五邑大学（江门-利物浦公共卫生研究所）招收药学、生物医药专业调剂生
+1/127
-
广东医科大学 陈胜昔教授团队（国家级人才；AI医药创新研发平台）高薪聘请博士后
+1/85
-
信息工程大学教授团队网络空间安全专业博士招生【2026年4月5日报名截止】
+2/54
-
山东青岛-导师招生
+1/52
-
导师招生
+1/38
-
哈尔滨工业大学深圳 金属增材制造方向博士招生
+1/32
-
山东农业大学化学工程专硕接受调剂
+1/21
-
省双一流重点学科，国家一流专业，轻工技术与工程，生物质能源与材料
+1/10
-
欢迎加入我们的团队！招博士 半导体光电子器件与集成
+1/9
-
调剂招生
+1/7
-
重庆三峡科技大学光纤传感课题组招调剂硕士研究生（3.30）
+1/6
-
北京石油化工学院机器人应用技术研究所2026年招收调剂研究生！
+1/5
-
齐齐哈尔大学李莉课题组诚招2026级考研调剂生（学硕和专硕）
+1/5
-
厦门大学电磁声学研究院 陈雅鸿副教授课题组 新增两名硕士研究生名额
+1/4
-
2026年云南大学青拔课题组招收地理学，大气科学、资源与环境等专业研究生
+1/3
-
2026年江西科技师范大学Tide课题组招收化学、生物、药学、材料相关学硕或专硕调剂生
+1/3
-
浙江大学能源工程学院王凯歌课题组招聘研发工程师
+1/2
-
哈尔滨医科大学李老师课题组招收生物信息学方向博士、硕士研究生
+1/1
恩啊 也许只能这样干了。。。。。。。。。 
10楼2011-10-05 23:45:35
btx362237729(金币+3): 非常感谢 2011-10-04 13:36:46
amisking(BioEPI+1): 鼓励应助。 2011-10-04 18:51:24
amisking(BioEPI+1): 鼓励应助。 2011-10-04 18:51:24
|
上柱之前先进行包涵体的复性 （1）将溶解的包涵体装入已经处理好的透析袋中，封好口，。 （2）放于4℃复性缓冲液中进行梯度复性，间隔时间为10-12h，复性缓冲液的浓度分别为：4.5mmol/L、3.5mmol/L、2.5mmol/L、1.5mmol/L、0.5mmol/L、0mmol/L。 （3）取出复性后的蛋白溶液12000rpm离心20min，取上清，分别取少量的上清和少许的沉淀进行SDS-PAGE，检测复性情况。 复性缓冲液：PBS 1mmol/LEDTA +尿素 |
2楼2011-10-04 13:16:47
3楼2011-10-04 13:17:59
4楼2011-10-04 13:30:32
