| 查看: 2393 | 回复: 7 | |||
| 本帖产生 1 个 MolEPI ，点击这里进行查看 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[求助]
SRAP分子标记跑不出好的条带
|
|||
现在在做SRAP，为什么电泳出的条带那么少而且有几对引物之前还可以勉强扩增出条带在做就死活扩不出了，怀疑是引物的问题但引物也换过了，我用的PCR体系（共10μL体系）：10Xbuffer(含镁离子）2.0μL、dntp(10mM)0.5μL、引物（10μM/L)0.5μL、酶（5U/μL)0.2μL。8%聚丙烯酰胺凝胶电泳…… |
回复此楼» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 【分子生物】EPI帖 |
» 猜你喜欢
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有184人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
-
氢氧化钾活化操作
已经有18人回复
-
散金
已经有68人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 微量紫外测DNA OD260\OD280的比值
已经有8人回复
- 公司返回的双向测通的序列个人如何拼接啊？
已经有9人回复
- T7载体的IPTG诱导
已经有10人回复
- 如何在蛋白纯化后去除6组氨酸(6His)标签
已经有17人回复
- 为何PCR产物测序只测一部分？
已经有9人回复
- KH550和KH570哪个更适合用于玻纤增强PET树脂？
已经有8人回复
- RT-PCR跑出来的条带没有量效关系怎么办？什么原因
已经有3人回复
- SRAP标记，制胶有点小疑问。。。求解
已经有7人回复
- 细菌RNA提取后跑电泳出现一条暗带和在泳道中弥散都是什么原因？
已经有9人回复
- ssr标记与srap标记可以用同一种酶吗？
已经有22人回复
- 做SRAP标记的进来，DNA聚丙烯酰胺电泳，预电泳问题。。。
已经有22人回复
- SRAP-PCR 正交优化的胶，怎么统计条带？迷茫ing。。。
已经有6人回复
- SSR分子标记读带方法及使用何种软件进行遗传图谱构建较合适
已经有2人回复
- SRAP分子标记是一对引物对应23个样品，还是一个样品对应23对引物？
已经有15人回复
- 【求助/交流】变性聚丙烯酰胺SRAP凝胶电泳
已经有8人回复
- 【求助/交流】蛋白跑还原电泳是一条带，但是跑非还原电泳三四条带，怎么使他产生单一�
已经有7人回复
zqt123_1981
木虫 (小有名气)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 1896.9
- 散金: 1035
- 红花: 1
- 帖子: 276
- 在线: 180.9小时
- 虫号: 164319
- 注册: 2006-01-12
- 性别: GG
- 专业: 果树学
4楼2011-10-19 16:30:40
wanhscn
木虫 (职业作家)
哲学@草根
- MolEPI: 26
- 应助: 53 (初中生)
- 贵宾: 0.87
- 金币: 3895.7
- 散金: 877
- 红花: 27
- 沙发: 14
- 帖子: 3642
- 在线: 526.2小时
- 虫号: 1376762
- 注册: 2011-08-22
- 性别: GG
- 专业: 植物遗传学
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★
西瓜(金币+5, MolEPI+1): 很在理啊！ 2011-09-30 23:43:06
小屁乖乖(金币+2): 2011-10-12 16:29:13
西瓜(金币+5, MolEPI+1): 很在理啊！ 2011-09-30 23:43:06
小屁乖乖(金币+2): 2011-10-12 16:29:13
|
1、10ul 的体系用10Xbuffer(含镁离子）2.0μL，什么意思？为什么用2ul而不用1ul。没有Buffer和镁离子分开的试剂？ 2、10ul体系，体系小，不稳定，建议20ul体系！ 3、泳道上面全是黑的，模板有降解！ 4、SRAP是RAPD的变种，稳定性稍微强于RAPD，但也没有强到那里去，一定程度的不稳定仍然存在。 5、开始扩增时遇到有差异的条带，可以挖出来稀释再P一次，连到载体上两端测序，后根据测序结果多加几个核苷酸设计引物，将其转化为稳定的标记。 |
2楼2011-09-30 22:04:14
bluysky0902
金虫 (正式写手)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1321
- 红花: 1
- 帖子: 521
- 在线: 93小时
- 虫号: 294845
- 注册: 2006-11-11
- 性别: GG
- 专业: 果树学
5楼2011-10-19 17:25:01
6楼2011-10-20 19:03:45
20