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酶连后的假阳性是怎么回事??
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loveskyzhou
铁虫
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(小学生)
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帖子: 316
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虫号: 1346820
[交流]
酶连后的假阳性是怎么回事??
自己构建的载体,在分别酶切又酶连后将质粒转入了DH5a,涂板后长了许多(但菌落体积感觉比DH5a一般情况要大)。 挑单克隆后提不出质粒,分别酶切和PCR鉴定都没有结果。。。。 这种假阳性是怎么造成的。。。。
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萝卜丝儿
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2011-09-29 14:53:18
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tdhslxiaoyao
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★
loveskyzhou(金币
+1
):谢谢参与
引用回帖:
3楼
:
Originally posted by
萝卜丝儿
at 2011-09-29 15:40:48:
你连接用的酶切位点是什么?是不是粘性末端正好互补了?然后自连。。。建议做个正负对照。
同意,应该是载体自连
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4楼
2011-09-30 10:39:15
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yang0071
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★
loveskyzhou(金币
+1
):谢谢参与
原因很多种,最常见的有 抗生素过期了;有污染
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2楼
2011-09-29 15:37:03
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萝卜丝儿
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loveskyzhou(金币
+1
):谢谢参与
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amisking(金币+1): 鼓励发帖交流。 2011-09-29 17:32:14
amisking(金币+1): 鼓励发帖交流。 2011-09-29 17:32:15
你连接用的酶切位点是什么?是不是粘性末端正好互补了?然后自连。。。建议做个正负对照。
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3楼
2011-09-29 15:40:48
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