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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 酶连后的假阳性是怎么回事？？
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loveskyzhou

铁虫 (正式写手)

[交流] 酶连后的假阳性是怎么回事？？

自己构建的载体，在分别酶切又酶连后将质粒转入了DH5a，涂板后长了许多（但菌落体积感觉比DH5a一般情况要大）。 挑单克隆后提不出质粒，分别酶切和PCR鉴定都没有结果。。。。 这种假阳性是怎么造成的。。。。
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萝卜丝儿

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1楼 2011-09-29 14:53:18
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萝卜丝儿

木虫 (小有名气)
★ ★ ★
loveskyzhou(金币+1):谢谢参与
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amisking(金币+1): 鼓励发帖交流。 2011-09-29 17:32:14
amisking(金币+1): 鼓励发帖交流。 2011-09-29 17:32:15
你连接用的酶切位点是什么？是不是粘性末端正好互补了？然后自连。。。建议做个正负对照。
赞一下(3人) 回复此楼
3楼2011-09-29 15:40:48
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yang0071

木虫 (职业作家)
★
loveskyzhou(金币+1):谢谢参与
原因很多种，最常见的有   抗生素过期了；有污染
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2楼2011-09-29 15:37:03
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tdhslxiaoyao

新虫 (小有名气)
★
loveskyzhou(金币+1):谢谢参与
引用回帖:
3楼: Originally posted by 萝卜丝儿 at 2011-09-29 15:40:48:
你连接用的酶切位点是什么？是不是粘性末端正好互补了？然后自连。。。建议做个正负对照。

同意，应该是载体自连
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2011-09-30 10:39:15
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