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niu1022

银虫 (初入文坛)

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[交流] 从液氮中取出的大肠杆菌直接接入种子罐可行吗？有必要摇瓶复苏一下吗？

重组大肠杆菌保存在液氮中，原来的做法是取5微升接入200毫升LB培养基中，
现在要种子液8L，所有要扩大培养，用种子罐培养。
方案一：取一支甘油管（菌液加甘油约1毫升），直接接入8L LB培养基中。
方案二：取5微升接入200毫升LB培养基中，等对数期时接入种子罐。
方案一步骤少，菌体的延缓期会延长，但应该会长到合适的OD。方案二稳妥，但多加一步，各位觉得呢？请高手指教，谢谢

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1楼 2011-09-29 10:23:06

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bohr86

木虫 (正式写手)

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★ ★ ★ ★ ★ ★
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wolfebst(金币+5): 鼓励新虫 2011-09-29 12:37:01

还是方案二吧~ 样品不多的情况下，能细致的地方没必要觉得麻烦省去那几步吧~

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2楼2011-09-29 10:50:58

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zhymhbu

木虫 (正式写手)

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★
niu1022(金币+1):谢谢参与

必须要活化的。一般甘油管都要活化一下，别说液氮保存的了

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4楼2011-09-29 14:03:17

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shzlyjgc

铜虫 (初入文坛)

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★
niu1022(金币+1):谢谢参与

保藏菌种用于生产都要进过活化！

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6楼2011-09-29 17:03:18

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kcb331202273

金虫 (小有名气)

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★
niu1022(金币+1):谢谢参与

通常情况下，进种子罐前，需要在摇瓶先将种子活化。如果直接接入种子罐，即使长起来了，活力也不太好。

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7楼2011-09-30 08:27:15

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liumiao05

至尊木虫 (知名作家)

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★
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方案二

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8楼2011-09-30 10:34:51

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dyydhl

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★
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活化后加入，方案二不错

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9楼2011-10-02 09:02:51

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doukezhiwu

木虫 (著名写手)

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★
niu1022(金币+1):谢谢参与

方案一必须先活化，复苏一下，之后再介入种子罐

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10楼2011-10-07 08:42:13

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asznpb

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niu1022(金币+1):谢谢参与

最好还是活化一下吧，这样也不费啥事

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11楼2011-10-07 08:59:08

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whl6673

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★
zhang8826857(金币+1): 呵呵，不活化是不行的。回答问题尽量全面些哦^_^ 2011-10-07 10:26:10

不活化老师吵你

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12楼2011-10-07 09:52:28

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mysenyuan

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大家说的对，必须活化，激发出活力，以便适应更复杂的环境……

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13楼2011-10-07 23:23:24

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loganfan

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★
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种子的接种是有比例要求的，一般都是5-20倍的比例，这样能保证种子的良好生长，你这比例，不靠谱

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14楼2011-10-14 20:48:32

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lhl0538

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实际生产中，活化是必不可少的，必须加的。

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15楼2011-10-18 07:54:00

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dasheng1980

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还是方案二吧,活化一下保险；

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16楼2011-10-19 15:56:18

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5633248983楼

2011-09-29 10:59 回复

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tianxin58595楼

2011-09-29 14:15 回复

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