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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 从液氮中取出的大肠杆菌直接接入种子罐可行吗？有必要摇瓶复苏一下吗？
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niu1022

银虫 (初入文坛)

[交流] 从液氮中取出的大肠杆菌直接接入种子罐可行吗？有必要摇瓶复苏一下吗？

重组大肠杆菌保存在液氮中，原来的做法是取5微升接入200毫升LB培养基中，
现在要种子液8L，所有要扩大培养，用种子罐培养。
方案一：取一支甘油管（菌液加甘油约1毫升），直接接入8L LB培养基中。
方案二：取5微升接入200毫升LB培养基中，等对数期时接入种子罐。
方案一步骤少，菌体的延缓期会延长，但应该会长到合适的OD。方案二稳妥，但多加一步，各位觉得呢？请高手指教，谢谢
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1楼 2011-09-29 10:23:06
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zhymhbu

木虫 (正式写手)
★
niu1022(金币+1):谢谢参与
必须要活化的。一般甘油管都要活化一下，别说液氮保存的了
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4楼2011-09-29 14:03:17
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bohr86

木虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★ ★ ★
niu1022(金币+1):谢谢参与
wolfebst(金币+5): 鼓励新虫 2011-09-29 12:37:01
还是方案二吧~ 样品不多的情况下，能细致的地方没必要觉得麻烦省去那几步吧~
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2楼2011-09-29 10:50:58
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shzlyjgc

铜虫 (初入文坛)
★
niu1022(金币+1):谢谢参与
保藏菌种用于生产都要进过活化！
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6楼2011-09-29 17:03:18
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kcb331202273

金虫 (小有名气)
★
niu1022(金币+1):谢谢参与
通常情况下，进种子罐前，需要在摇瓶先将种子活化。如果直接接入种子罐，即使长起来了，活力也不太好。
赞一下(1人) 回复此楼
7楼2011-09-30 08:27:15
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