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从液氮中取出的大肠杆菌直接接入种子罐可行吗?有必要摇瓶复苏一下吗?
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niu1022
银虫
(初入文坛)
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(幼儿园)
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帖子: 50
在线: 2.5小时
虫号: 386106
[交流]
从液氮中取出的大肠杆菌直接接入种子罐可行吗?有必要摇瓶复苏一下吗?
重组大肠杆菌保存在液氮中,原来的做法是取5微升接入200毫升LB培养基中,
现在要种子液8L,所有要扩大培养,用种子罐培养。
方案一:取一支甘油管(菌液加甘油约1毫升),直接接入8L LB培养基中。
方案二:取5微升接入200毫升LB培养基中,等对数期时接入种子罐。
方案一步骤少,菌体的延缓期会延长,但应该会长到合适的OD。方案二稳妥,但多加一步,各位觉得呢?请高手指教,谢谢
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1楼
2011-09-29 10:23:06
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loganfan
银虫
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虫号: 1392968
★
小木虫(金币
+0.5
):给个红包,谢谢回帖
种子的接种是有比例要求的,一般都是5-20倍的比例,这样能保证种子的良好生长,你这比例,不靠谱
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14楼
2011-10-14 20:48:32
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bohr86
木虫
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帖子: 559
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虫号: 700078
★ ★ ★ ★ ★ ★
niu1022(金币
+1
):谢谢参与
wolfebst(金币+5): 鼓励新虫 2011-09-29 12:37:01
还是方案二吧~ 样品不多的情况下,能细致的地方没必要觉得麻烦省去那几步吧~
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2楼
2011-09-29 10:50:58
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zhymhbu
木虫
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在线: 131.3小时
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★
niu1022(金币
+1
):谢谢参与
必须要活化的。一般甘油管都要活化一下,别说液氮保存的了
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4楼
2011-09-29 14:03:17
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shzlyjgc
铜虫
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虫号: 1360861
★
niu1022(金币
+1
):谢谢参与
保藏菌种用于生产都要进过活化!
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6楼
2011-09-29 17:03:18
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