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niu1022

银虫 (初入文坛)


[交流] 从液氮中取出的大肠杆菌直接接入种子罐可行吗?有必要摇瓶复苏一下吗?

重组大肠杆菌保存在液氮中,原来的做法是取5微升接入200毫升LB培养基中,
现在要种子液8L,所有要扩大培养,用种子罐培养。
方案一:取一支甘油管(菌液加甘油约1毫升),直接接入8L LB培养基中。
方案二:取5微升接入200毫升LB培养基中,等对数期时接入种子罐。
方案一步骤少,菌体的延缓期会延长,但应该会长到合适的OD。方案二稳妥,但多加一步,各位觉得呢?请高手指教,谢谢
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kcb331202273

金虫 (小有名气)



niu1022(金币+1):谢谢参与
通常情况下,进种子罐前,需要在摇瓶先将种子活化。如果直接接入种子罐,即使长起来了,活力也不太好。
7楼2011-09-30 08:27:15
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bohr86

木虫 (正式写手)


★ ★ ★ ★ ★ ★
niu1022(金币+1):谢谢参与
wolfebst(金币+5): 鼓励新虫 2011-09-29 12:37:01
还是方案二吧~ 样品不多的情况下,能细致的地方没必要觉得麻烦省去那几步吧~
2楼2011-09-29 10:50:58
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zhymhbu

木虫 (正式写手)



niu1022(金币+1):谢谢参与
必须要活化的。一般甘油管都要活化一下,别说液氮保存的了
4楼2011-09-29 14:03:17
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shzlyjgc

铜虫 (初入文坛)



niu1022(金币+1):谢谢参与
保藏菌种用于生产都要进过活化!
6楼2011-09-29 17:03:18
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