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niu1022

银虫 (初入文坛)


[交流] 从液氮中取出的大肠杆菌直接接入种子罐可行吗?有必要摇瓶复苏一下吗?

重组大肠杆菌保存在液氮中,原来的做法是取5微升接入200毫升LB培养基中,
现在要种子液8L,所有要扩大培养,用种子罐培养。
方案一:取一支甘油管(菌液加甘油约1毫升),直接接入8L LB培养基中。
方案二:取5微升接入200毫升LB培养基中,等对数期时接入种子罐。
方案一步骤少,菌体的延缓期会延长,但应该会长到合适的OD。方案二稳妥,但多加一步,各位觉得呢?请高手指教,谢谢
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bohr86

木虫 (正式写手)


★ ★ ★ ★ ★ ★
niu1022(金币+1):谢谢参与
wolfebst(金币+5): 鼓励新虫 2011-09-29 12:37:01
还是方案二吧~ 样品不多的情况下,能细致的地方没必要觉得麻烦省去那几步吧~
2楼2011-09-29 10:50:58
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zhymhbu

木虫 (正式写手)



niu1022(金币+1):谢谢参与
必须要活化的。一般甘油管都要活化一下,别说液氮保存的了
4楼2011-09-29 14:03:17
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shzlyjgc

铜虫 (初入文坛)



niu1022(金币+1):谢谢参与
保藏菌种用于生产都要进过活化!
6楼2011-09-29 17:03:18
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kcb331202273

金虫 (小有名气)



niu1022(金币+1):谢谢参与
通常情况下,进种子罐前,需要在摇瓶先将种子活化。如果直接接入种子罐,即使长起来了,活力也不太好。
7楼2011-09-30 08:27:15
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liumiao05

至尊木虫 (知名作家)



niu1022(金币+1):谢谢参与
方案二
8楼2011-09-30 10:34:51
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dyydhl

新虫 (初入文坛)



niu1022(金币+1):谢谢参与
活化后加入,方案二不错
9楼2011-10-02 09:02:51
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doukezhiwu

木虫 (著名写手)



niu1022(金币+1):谢谢参与
方案一必须先活化,复苏一下,之后再介入种子罐
10楼2011-10-07 08:42:13
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asznpb

木虫 (正式写手)



niu1022(金币+1):谢谢参与
最好还是活化一下吧,这样也不费啥事
11楼2011-10-07 08:59:08
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whl6673

金虫 (小有名气)



zhang8826857(金币+1): 呵呵,不活化是不行的。回答问题尽量全面些哦^_^ 2011-10-07 10:26:10
不活化老师吵你
12楼2011-10-07 09:52:28
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mysenyuan

银虫 (小有名气)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
大家说的对,必须活化,激发出活力,以便适应更复杂的环境……
13楼2011-10-07 23:23:24
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loganfan

银虫 (正式写手)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
种子的接种是有比例要求的,一般都是5-20倍的比例,这样能保证种子的良好生长,你这比例,不靠谱
14楼2011-10-14 20:48:32
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lhl0538

木虫 (小有名气)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
实际生产中,活化是必不可少的,必须加的。
15楼2011-10-18 07:54:00
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dasheng1980

铁杆木虫 (知名作家)



小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
还是方案二吧,活化一下保险;
16楼2011-10-19 15:56:18
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简单回复
5633248983楼
2011-09-29 10:59   回复  
niu1022(金币+1):谢谢参与
2011-09-29 14:15   回复  
niu1022(金币+1):谢谢参与
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