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amq7392

铁杆木虫 (著名写手)

[求助] 关于真菌发酵结球问题

我做的白腐真菌发酵产酶实验,500ml摇瓶培养,以前在往复式摇床上,菌丝长成很多小球,生长良好;现在往复式摇床报废了,换了一台旋转式摇床,菌丝不是长成很多小球,而是长成一个大团块,请问这是什么原因?该怎么解决,才能达到往复式摇床上的效果? 我想过使用带挡板的三角瓶或加玻璃珠。不知各位有没有遇到过类似问题,怎么解决的?
我的菌种都不产孢子,是挑取斜面或平板上的菌丝块接种的。

[ Last edited by amq7392 on 2011-9-28 at 17:12 ]
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amq7392

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by HarveyWang at 2011-09-28 19:02:41:
挡板 可以将菌丝球变小的。但也会产生大量泡沫。 只要你不介意。

玻璃珠也可以。
记得别放多了,多于10个,那就成了研磨细胞了。
建议放1、2、3、4、5个试试,用含有菌丝球的发酵液摇上一天,就看出效果了。 ...

谢谢!不知道菌丝球大小和溶氧量有没有关系,我都是用棉塞做瓶塞的,据说棉塞通气不好。另外,往复式摇床之所以效果好,是因为通气效果好,还是因为往复式振荡造成的培养液和瓶壁的撞击作用呢?
6楼2011-09-28 21:22:02
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jiasanlin

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
amisking(金币+2): 鼓励应助。 2011-09-28 19:27:14
我们实验室都是用旋转摇床培养真菌的,基本上菌丝球生长都挺好的。你现在的情况有几种怀疑:
1. 摇床的转速不够
2. 培养基装液量偏大
3. 其它培养条件与复式摇床有差别,例如:温度 通气量等是不是没有控制好。
2楼2011-09-28 17:45:14
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amq7392

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by jiasanlin at 2011-09-28 17:45:14:
我们实验室都是用旋转摇床培养真菌的,基本上菌丝球生长都挺好的。你现在的情况有几种怀疑:
1. 摇床的转速不够
2. 培养基装液量偏大
3. 其它培养条件与复式摇床有差别,例如:温度 通气量等是不是没有控制好。

谢谢您的回复。针对您的3个怀疑,我分别回答一下:
1.摇床转速200转/min
2.500ml三角瓶装了80ml培养液
3.温度、装液量与往复式摇床一致,瓶塞都是用的棉塞。
3楼2011-09-28 18:13:43
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jiasanlin

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
amisking(金币+2): 鼓励应助。 2011-09-28 19:27:22
条件应该没有问题呀,我们做黑曲霉时一般用孢子接。你可以考虑将少量菌丝块先放到含1ml培养基的2ml 离心管中,用混匀器多涡旋几次把打打散然后再去接种。

有时为了增加菌丝球数量,我们在培养基中加入极少少量的麸皮之类的小颗粒,培养后菌体就以麸皮为核心开始生长,你的白腐菌应该也可以直接利用麸皮吧。
4楼2011-09-28 18:55:20
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