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amq7392

铁杆木虫 (著名写手)

[求助] 关于真菌发酵结球问题

我做的白腐真菌发酵产酶实验,500ml摇瓶培养,以前在往复式摇床上,菌丝长成很多小球,生长良好;现在往复式摇床报废了,换了一台旋转式摇床,菌丝不是长成很多小球,而是长成一个大团块,请问这是什么原因?该怎么解决,才能达到往复式摇床上的效果? 我想过使用带挡板的三角瓶或加玻璃珠。不知各位有没有遇到过类似问题,怎么解决的?
我的菌种都不产孢子,是挑取斜面或平板上的菌丝块接种的。

[ Last edited by amq7392 on 2011-9-28 at 17:12 ]
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HarveyWang

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
amisking(金币+5, MicEPI+1): 鼓励应助。 2011-09-28 19:27:29
amq7392(金币+5): 2011-10-04 19:40:46
引用回帖:
1楼: Originally posted by amq7392 at 2011-09-28 17:11:37:
我做的白腐真菌发酵产酶实验,500ml摇瓶培养,以前在往复式摇床上,菌丝长成很多小球,生长良好;现在往复式摇床报废了,换了一台旋转式摇床,菌丝不是长成很多小球,而是长成一个大团块,请问这是什么原 ...

挡板 可以将菌丝球变小的。但也会产生大量泡沫。 只要你不介意。

玻璃珠也可以。
记得别放多了,多于10个,那就成了研磨细胞了。
建议放1、2、3、4、5个试试,用含有菌丝球的发酵液摇上一天,就看出效果了。
然后决定用几个玻璃球。 (我说的玻璃球直径约4-6 mm)。
玻璃球用多少合适------和摇瓶大小和摇床转速有关。

还有一种方法,跟放挡板差不多。就是放一圈钢丝圈。钢丝圈是稀疏的一圈圈的,可以破坏大的菌丝球。
钢丝圈 螺旋直径大约为1cm,螺距大约为0.4-0.6cm,钢丝直径1-2mm。
螺距过小的话,起不到打碎菌丝球的作用。

还有最简陋的最后一种办法:在摇瓶内放一个钢制的钥匙圈。呵呵。。。一个足矣。而且也很便宜。。。。
【我一直认为做土匪很性感很坏,很直接,可以大声喊:JCMM我爱你!所以,我自从博士毕业后,就一直在寻找黑道大哥一起去抢钱、抢粮、抢地盘】
5楼2011-09-28 19:02:41
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jiasanlin

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
amisking(金币+2): 鼓励应助。 2011-09-28 19:27:14
我们实验室都是用旋转摇床培养真菌的,基本上菌丝球生长都挺好的。你现在的情况有几种怀疑:
1. 摇床的转速不够
2. 培养基装液量偏大
3. 其它培养条件与复式摇床有差别,例如:温度 通气量等是不是没有控制好。
2楼2011-09-28 17:45:14
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amq7392

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by jiasanlin at 2011-09-28 17:45:14:
我们实验室都是用旋转摇床培养真菌的,基本上菌丝球生长都挺好的。你现在的情况有几种怀疑:
1. 摇床的转速不够
2. 培养基装液量偏大
3. 其它培养条件与复式摇床有差别,例如:温度 通气量等是不是没有控制好。

谢谢您的回复。针对您的3个怀疑,我分别回答一下:
1.摇床转速200转/min
2.500ml三角瓶装了80ml培养液
3.温度、装液量与往复式摇床一致,瓶塞都是用的棉塞。
3楼2011-09-28 18:13:43
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jiasanlin

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
amisking(金币+2): 鼓励应助。 2011-09-28 19:27:22
条件应该没有问题呀,我们做黑曲霉时一般用孢子接。你可以考虑将少量菌丝块先放到含1ml培养基的2ml 离心管中,用混匀器多涡旋几次把打打散然后再去接种。

有时为了增加菌丝球数量,我们在培养基中加入极少少量的麸皮之类的小颗粒,培养后菌体就以麸皮为核心开始生长,你的白腐菌应该也可以直接利用麸皮吧。
4楼2011-09-28 18:55:20
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