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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 求高手帮我看看DGGE图片，为什么跑不开，非常感谢
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liyixmu

金虫 (小有名气)

[求助] 求高手帮我看看DGGE图片，为什么跑不开，非常感谢

我做的海水中的细菌，我用40%和60%的胶。30v预电泳30分钟。110v，5个半小时。结果感觉条带都集中在胶的中部，没有分开。是因为胶浓度的原因吗？那该用多大 的胶浓度呢？还有以前跑DGGE，loading buffer都是跑出来2个不同颜色的带（绿色和蓝色）但是这次只有一条绿色的带。求各位高手帮忙，非常感谢！
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don'tworry，behappy！
1楼 2011-09-20 09:31:51
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zhang226296

新虫 (小有名气)
引用回帖:
18楼: Originally posted by jipojiong at 2011-10-19 09:02:27
不知道楼主这个问题解决了没？ 我在实验中发现实验室的梯度混胶仪有问题，导致胶的下面是单一的高浓度 上面是单一的低浓度，有变性梯度的集中在胶中间很窄的一部分 ，实验结果也和楼主一样条带集中在中部。 楼主先检 ...

求助，我开始做DGGE,胶浓度45%-60%时，条带在胶的中下部，而且只有三条，MARKER跑出来2000,1000和750的条带，第二天我换成50%-65%时，条带在中上部，也只有三条，MARKER六条带都跑出来了，100,250,500离得很近，这是为什么呢，是我的胶浓度还没调对吗，应该上调还是下调啊，求你给点意见，谢谢啊
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29楼2014-03-02 20:59:20
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zhang226296

新虫 (小有名气)
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26楼: Originally posted by 陌雨3783 at 2012-10-23 10:04:43
我做的是池塘水样多样性的，梯度在35%-60%之间，电压75v,时间16h，跑得还行

求助，我开始做DGGE,胶浓度45%-60%时，条带在胶的中下部，而且只有三条，MARKER跑出来2000,1000和750的条带，第二天我换成50%-65%时，条带在中上部，也只有三条，MARKER六条带都跑出来了，100,250,500离得很近，这是为什么呢，是我的胶浓度还没调对吗，应该上调还是下调啊，求你给点意见，谢谢啊
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30楼2014-03-02 21:02:52
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zhang226296

新虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by power5 at 2011-09-21 09:34:34
这个可能有两方面的原因：一是跑的时间太短了，可以延长一些，例如80
v16h，110v10h。如果跑的时间延长了还是这样那样，就是变性梯度太宽了，可以调成45%~55%。不过40%~60%的变性梯度已经很窄了，是不是样品比较特 ...

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31楼2014-03-02 21:15:46
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zhang226296

新虫 (小有名气)
引用回帖:
13楼: Originally posted by warrrraw at 2011-09-21 18:42:37
可能是制胶的时候出了问题，导致梯度发生变化。海水的我也做过，正常情况下不会集中在一块的。

求助，我开始做DGGE,胶浓度45%-60%时，条带在胶的中下部，而且只有三条，MARKER跑出来2000,1000和750的条带，第二天我换成50%-65%时，条带在中上部，也只有三条，MARKER六条带都跑出来了，100,250,500离得很近，这是为什么呢，是我的胶浓度还没调对吗，应该上调还是下调啊，求高手给点意见，谢谢啊
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32楼2014-03-02 21:16:48
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zhang226296

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 木羊易 at 2011-09-20 12:58:26
可以把胶浓度提高！比如10%，12%

我也遇到同样的问题，8%的胶不管什么变性梯度条带总是在下半部分，求赐教，我该怎么做呀，谢谢
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33楼2014-03-23 18:41:45
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