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天使托

专家顾问 (职业作家)

T.Shen

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
dhd997(金币+5, MolEPI+1): 2011-08-30 17:12:00
ybs007(金币+5): 感激不尽 2011-08-31 10:18:26

其实照楼主所说已经得到了重组载体，而且你基本已经确定正确了，就是需要一张perfect的酶切图把？
其实照你所说的，因为你的载体上连接的片段是400bp，相对较小一些，你的载体大小5.4kb,是基因的将近14倍，酶切的话应该选择一个稍微大一点的体系，至少得20ul以上，而且你要确保你的重组载体量足够大，就是电泳显示比较亮，这样你酶切之后才会看到那条400bp比较小的条带。。。如果重组载体量很少，那么直接over，不用酶切了，肯定看不到的。。。
我原来也遇到过类似的问题，你可以参看我这篇帖子，相信你一看就知道该如何去做了！
http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=3357650

祝好运！