[求助] 转质粒不成功,好几次了,大家给分析一下问题会出在哪里

6楼: Originally posted by 天使托 at 2011-08-23 21:44:05:
很明显主要原因应该是连接的问题了
1：你的载体和基因酶切是否完全，尤其是载体，酶切出来的条带要单一；还有就是载体和基因酶切完全后，要纯化完全，不然很影响后期连接酶的效率的；
2：连接体系的设置，可以根 ...

8楼: Originally posted by 天使托 at 2011-08-24 10:29:55:
没有所谓的通用比例，具体载体和基因添加多少，我们这边有个公式:1/10<载体质量/大小/基因质量/基因大小<1/3

所以连接体系中载体和基因的添加量不光是根据纯化电泳后的亮度而定，还要根据载体和基因的大 ...

10楼: Originally posted by 天使托 at 2011-08-24 11:14:30:
不完全对。。。说的不太准确。。。
你就按我给你说的公式 算算，出来肯定有一个添加量的范围。。。
要不你说说你定量出来的载体和基因是多少？1ul载体和基因分别多少ng？
载体多大？基因多大？