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chunmeiyang

银虫 (正式写手)

[求助] WB抗体孵育问题!

问一下大家,在做Western Blot孵育一抗时,大家都是用脱脂奶粉稀释抗体的吗?用脱脂奶粉稀释的原因是什么啊
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永峰1230

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by hgq115 at 2011-08-23 14:21:42
抗体稀释一般不用脱脂奶粉吧,用BSA好点,我们都在封闭的时候用脱脂奶粉。

一抗使用 TBST  稀释,  封闭液使用BSA ,,二抗 也是 TBST 稀释,,这样可以吗?
12
7楼2014-04-12 19:26:34
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查看全部 8 个回答

子曰包子好吃

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
lstt09nk(金币+2): 感谢参与 2011-08-23 13:56:29
chunmeiyang(金币+1): 2011-08-27 08:45:29
抗体说明书上都有说明,大部分使用5%的BSA稀释的。当然用专门的一抗稀释液更好,用一抗稀释液可以重复使用。
2楼2011-08-23 13:54:08
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hgq115

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
adslye(金币+2): 感谢交流~祝顺利! 2011-08-23 17:03:03
chunmeiyang(金币+1): 2011-08-27 08:45:45
抗体稀释一般不用脱脂奶粉吧,用BSA好点,我们都在封闭的时候用脱脂奶粉。
3楼2011-08-23 14:21:42
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hf2016

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


lstt09nk(金币+1): 是的 2011-08-24 13:20:45
chunmeiyang(金币+1): 2011-08-27 08:46:00
脱脂奶粉的目的主要是为了封闭膜上的非特异性蛋白结合位点,防止一抗、二抗的非特异性反应,
一切开始于结束之后
4楼2011-08-24 12:54:37
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