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chunmeiyang

银虫 (正式写手)

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[求助] WB抗体孵育问题！

问一下大家，在做Western Blot孵育一抗时，大家都是用脱脂奶粉稀释抗体的吗？用脱脂奶粉稀释的原因是什么啊

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1楼 2011-08-23 13:51:36

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hf2016

金虫 (正式写手)

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专业: 蛋白质组学

【答案】应助回帖

★
lstt09nk(金币+1): 是的 2011-08-24 13:20:45
chunmeiyang(金币+1): 2011-08-27 08:46:00

脱脂奶粉的目的主要是为了封闭膜上的非特异性蛋白结合位点，防止一抗、二抗的非特异性反应，

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一切开始于结束之后

4楼2011-08-24 12:54:37

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子曰包子好吃

银虫 (小有名气)

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【答案】应助回帖

★ ★
lstt09nk(金币+2): 感谢参与 2011-08-23 13:56:29
chunmeiyang(金币+1): 2011-08-27 08:45:29

抗体说明书上都有说明，大部分使用5%的BSA稀释的。当然用专门的一抗稀释液更好，用一抗稀释液可以重复使用。

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2楼2011-08-23 13:54:08

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hgq115

金虫 (小有名气)

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【答案】应助回帖

★ ★
adslye(金币+2): 感谢交流~祝顺利！ 2011-08-23 17:03:03
chunmeiyang(金币+1): 2011-08-27 08:45:45

抗体稀释一般不用脱脂奶粉吧，用BSA好点，我们都在封闭的时候用脱脂奶粉。

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3楼2011-08-23 14:21:42

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silicare

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5楼2011-08-30 14:51:52

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