24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 1135  |  回复: 9
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

yafang21

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于qRT-PCR

最近在做qRT-PCR, 设计了几对引物(根据CDS序列设计的),在cDNA中扩增不出目的条带(但是有其他片段的杂带,比目的片段长300-400bp,只有一条),但在基因组中可以顺利扩增出一条很亮的很好的目的条带。这种情况已经出现在好几对引物身上了,难道是在信使RNA的内含子剪切之后的RNA编辑又加进去那么长的片段?感觉这个不太可能。求大虾指点迷津~~~
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yafang21

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by shaquila at 2011-08-15 10:14:04:
如果你的基因表达量很低,那很可能出不来带

嗯!表达量低的话是没条带,这种情况下扩增出来的条带属于非特异性扩增吗?但是觉得非特异性扩增条带很亮,像是主条带
5楼2011-08-15 10:19:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

blackrose8089

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖


西瓜(金币+1): 鼓励应助。最近很活跃哈 2011-08-15 13:06:28
yafang21(金币+1): 2011-08-20 09:17:12
楼主的内参基因能扩出来吗?材料是原核还是真核?可能楼主的模板不太好!
jiayoubashaonian
2楼2011-08-15 08:45:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yafang21

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
1楼: Originally posted by yafang21 at 2011-08-15 08:03:45:
最近在做qRT-PCR, 设计了几对引物(根据CDS序列设计的),在cDNA中扩增不出目的条带(但是有其他片段的杂带,比目的片段长300-400bp,只有一条),但在基因组中可以顺利扩增出一条很亮的很好的目的条带。这种情况 ...

内参可以扩出来,且内参是跨内含子的,在cDNA和基因组中的条带均没问题,很清晰很好。我的材料是水稻叶片。好几个基因的好几个引物都出现同样的问题,觉得很郁闷
3楼2011-08-15 09:08:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shaquila

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


西瓜(金币+1): 鼓励 2011-08-15 13:06:37
yafang21(金币+1): 2011-08-20 09:17:34
如果你的基因表达量很低,那很可能出不来带
4楼2011-08-15 10:14:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 086502化学工程342求调剂 +4 阿姨复古不过 2026-03-27 4/200 2026-03-28 04:41 by wxiongid
[考研] 328求调剂 +7 嗯滴的基本都 2026-03-27 7/350 2026-03-28 04:19 by fmesaito
[考研] 07化学280分求调剂 +10 722865 2026-03-23 10/500 2026-03-27 15:51 by Plutoqq
[考研] 0703化学一志愿南京师范大学303求调剂 +3 zzffylgg 2026-03-24 3/150 2026-03-27 10:42 by shangxh
[考研] 求调剂323材料与化工 +7 1124361 2026-03-24 7/350 2026-03-27 10:22 by wangjy2002
[考研] 一志愿武汉理工,总分321,英一数二,求老师收留。 +5 nnnnnnn5 2026-03-25 5/250 2026-03-27 04:42 by wxiongid
[考研] 325求调剂 +5 李嘉图·S·路 2026-03-23 5/250 2026-03-27 00:42 by wxiongid
[考研] 333求调剂 +7 87639 2026-03-21 12/600 2026-03-26 22:08 by 不吃魚的貓
[考研] 327求调剂 +7 prayer13 2026-03-23 7/350 2026-03-26 20:48 by 不吃魚的貓
[考研] 【双一流院校新能源、环境材料,材料加工与模拟招收大量调剂】 +4 Higraduate 2026-03-22 8/400 2026-03-26 20:34 by Higraduate
[考研] 271求调剂 +6 生如夏花… 2026-03-22 6/300 2026-03-26 16:48 by 张凯十八号
[考研] 总分293求调剂 +6 加一一九 2026-03-25 8/400 2026-03-26 13:30 by yujianx
[考研] 一志愿哈工大,085400,320,求调剂 +4 gdlf9999 2026-03-24 4/200 2026-03-25 23:01 by boxking200
[考研] 网络空间安全0839招调剂 +4 w320357296 2026-03-25 6/300 2026-03-25 17:59 by 255671
[考研] 材料调剂 +3 iwinso 2026-03-23 3/150 2026-03-25 11:29 by greychen00
[考研] 生物学学硕求调剂 +7 小羊睡着了? 2026-03-23 10/500 2026-03-25 02:24 by 清风拂扬。 m
[考研] 一志愿北化315 求调剂 +3 akrrain 2026-03-24 3/150 2026-03-24 19:35 by 了了了了。。
[考研] 080500求调剂 +3 zzzzfan 2026-03-24 3/150 2026-03-24 16:38 by barlinike
[考研] 293求调剂 +3 涛涛Wjt 2026-03-22 5/250 2026-03-22 22:21 by jiangpengfei
[考研] 一志愿东华大学控制学硕320求调剂 +3 Grand777 2026-03-21 3/150 2026-03-21 19:23 by 简之-
信息提示
请填处理意见