24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 843  |  回复: 4
本帖产生 1 个 MolEPI ,点击这里进行查看
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

lalafeng

银虫 (小有名气)

[求助] 连接转化后无结果

我的连接体系是:
目的片段1212bp:11u
质粒pET30:6u
T4连接酶:1u
Buffer:2u
这是我借鉴同学经常使用的体系,化转后在卡纳抗生素板上挑单菌落摇提质粒验证,板上的菌和大肠杆菌形态一样,气味也对的,挑了8个可是竟然都提不出质粒,我的表达宿主是BL21,试剂盒没问题,请高手指点,谢谢!
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

充实每一天,学会自控
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shaquila

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


lalafeng(金币+1): 2011-08-14 11:36:57
西瓜(金币+1): 鼓励 2011-08-15 13:11:16
要看摩尔数,第一次做按说明书里提供的比例把
4楼2011-08-13 21:17:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 5 个回答

blackrose8089

铁杆木虫 (职业作家)

★ ★
西瓜(金币+2): 鼓励 2011-08-13 00:38:06
我们实验室的体系:楼主可以试一下目的片段1212bp:1ul
质粒pET30:6u或3.5ul
T4连接酶:1u
Buffer:2u
jiayoubashaonian
2楼2011-08-12 22:24:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tingl0087

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
lalafeng(金币+4): 2011-08-14 11:36:48
西瓜(金币+5, MolEPI+1): 说得简单明了,就是这样! 2011-08-15 13:11:54
lalafeng(金币+1): 2011-08-16 09:56:04
这个要看目的基因与载体的摩尔比吧,分别跑电泳,根据marker估算下目的基因和载体大概有多少ng,然后分别除以它们的分子量算出来摩尔数,我们一般连接时目的基因与载体的摩尔比在3:1到10:1之间,20ul体系
3楼2011-08-13 19:10:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lalafeng

银虫 (小有名气)

非常感谢各位的建议
充实每一天,学会自控
5楼2011-08-15 09:52:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 085404,285分求调剂 +3 薇薇考研 2026-04-07 3/150 2026-04-08 12:46 by 猪会飞
[考研] 一志愿深大085601材料工程专业(专硕)300分可以调剂去哪 +12 10160315 2026-04-02 12/600 2026-04-08 11:49 by 猪会飞
[考研] 材料专硕322分 +12 哈哈哈吼吼吼哈 2026-04-02 12/600 2026-04-08 11:43 by 1753564080
[考研] 求调剂 一志愿西南交通大学085701环境工程 282分 +15 多多爱吃汉堡 2026-04-04 16/800 2026-04-08 11:39 by i_cooler
[考研] 材料调剂 +19 一样YWY 2026-04-02 20/1000 2026-04-08 11:02 by 不吃魚的貓
[考研] 材料专硕(0856) 339分求调剂 +14 哈哈哈鹅哈哈哈 2026-04-05 14/700 2026-04-07 22:02 by lijunpoly
[考研] 材料求调剂 +18 一样YWY 2026-04-05 18/900 2026-04-07 15:49 by dxlg
[考研] 0702物理学学硕299求调剂 +3 祁柒连 2026-04-06 3/150 2026-04-07 12:48 by 小木虫gyh
[考研] 一志愿苏州大学材料工程(085601)专硕有科研经历三项国奖两个实用型专利一项省级立项 +11 大火山小火山 2026-04-05 11/550 2026-04-06 22:55 by yunlongyang
[考研] 372分,材料与化工,一志愿湖南大学,求调剂 +3 蓝笺片 2026-04-01 3/150 2026-04-06 09:04 by 无际的草原
[考研] 0703求调剂383分 +9 W55j 2026-04-03 9/450 2026-04-06 06:50 by houyaoxu
[考研] 308求调剂 +4 maverick^_^ 2026-04-03 4/200 2026-04-05 19:08 by 蓝云思雨
[考研] 考研调剂生寻找导师 +3 顾瞻考研啊 2026-04-05 3/150 2026-04-05 18:18 by 啵啵啵0119
[考研] 一志愿上海海洋大学083200食品学硕,求调剂,接受其他专业083200 +4 what张 2026-04-04 5/250 2026-04-05 14:07 by chw1980_0
[考研] 328分调剂 +6 门men 2026-04-04 6/300 2026-04-05 13:40 by imissbao
[考研] 0835学硕299求调剂 08大类可接受 +5 useryy 2026-04-03 5/250 2026-04-04 20:07 by 蓝云思雨
[考研] 085602 找调剂 +4 逆时针快乐 2026-04-02 4/200 2026-04-04 19:32 by 蓝云思雨
[考研] 275学硕081000服从调剂到其他专业,保不住本专业了 +7 一只小小水牛 2026-04-02 8/400 2026-04-02 14:23 by alice-2022
[考研] 08工科求调剂290分 +5 1314捧花 2026-04-02 8/400 2026-04-02 13:16 by 乔哒哒哒
[考研] 286求调剂 +5 Sa67890. 2026-04-01 7/350 2026-04-01 19:50 by 6781022
信息提示
请填处理意见