| 查看: 1552 | 回复: 6 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
duanming123木虫 (正式写手)
|
[求助]
actin扩不出来？
|
|
刚反转录出的cDNA, actin扩不出来，引物没问题，用的是Mix,模板稀释了5倍，RNA质量还行，是不是模板浓度太高了，在稀释做做？大家谁遇到种问题？ |
回复此楼» 猜你喜欢
336求调剂
已经有5人回复
-
277材料科学与工程080500求调剂
已经有6人回复
-
333求调剂
已经有4人回复
-
286求调剂
已经有8人回复
-
298求调剂
已经有4人回复
-
306求0703调剂一志愿华中师范
已经有5人回复
-
299求调剂
已经有7人回复
-
26考研一志愿中国石油大学(华东)305分求调剂
已经有6人回复
-
初试 317
已经有5人回复
-
296求调剂
已经有3人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- ORF老是扩不出来
已经有8人回复
- cDNA做普通PCR扩不出条带来
已经有13人回复
- PCR 扩全长
已经有20人回复
- [求助]高保真酶扩不出来
已经有15人回复
- 【求助/交流】设计的简并引物扩不出目的条带，求助
已经有18人回复
- 【求助/交流】总RNA反转录出的cDNA 怎样检测出来
已经有9人回复
- 【求助/交流】实时定量内参无条带！
已经有7人回复
- 【求助/交流】western 曝光actin正常，但是样品却曝不出来
已经有37人回复
- 【求助/交流】做DGGE，直接用带夹引物扩增不出来，怎么办？
已经有10人回复
- 【讨论】F-actin 染色中为什么染不出纤维状图片
已经有7人回复
- 【求助/交流】为什么用纯化的PCR产物就扩不出来？？？
已经有14人回复
- 【求助/交流】PCR扩增核心片段，再也扩不出来了，怎么办
已经有16人回复
- 怎么扩不出来
已经有7人回复
lxmzhj1984
银虫 (小有名气)
- 应助: 7 (幼儿园)
- 金币: 373.4
- 散金: 20
- 红花: 1
- 帖子: 111
- 在线: 36.6小时
- 虫号: 1721565
- 注册: 2012-03-28
- 性别: GG
- 专业: 植物生理与生化
7楼2012-03-29 15:24:46
2楼2011-08-14 01:55:43
qingyuansw20
金虫 (小有名气)
- 应助: 14 (小学生)
- 金币: 382.5
- 散金: 21
- 红花: 3
- 帖子: 217
- 在线: 67.2小时
- 虫号: 1050181
- 注册: 2010-07-01
- 专业: 细胞增殖、生长与分化
【答案】应助回帖
★ ★
adslye(金币+1): 反转录一般20Ul体系2ugRNA没问题，cdna可以电泳看 2011-08-14 09:20:42
adslye(金币+1): 鼓励交流，cdna跑电泳没意义 2011-08-14 09:22:36
duanming123(金币+1): 5 2011-08-14 17:10:49
adslye(金币+1): 反转录一般20Ul体系2ugRNA没问题，cdna可以电泳看 2011-08-14 09:20:42
adslye(金币+1): 鼓励交流，cdna跑电泳没意义 2011-08-14 09:22:36
duanming123(金币+1): 5 2011-08-14 17:10:49
|
1、RNA浓度问题，不知道你测定RNA浓度了吗？一个反转录体系RNA浓度要求在500ng以内。高了不行。超了引物浓度还怎么扩？一般我提出的总RNA，要稀释20倍以上。 2、CDNA没成，建议反转录后做个电泳看下，CDNA电泳一条带。 3、PCR时，内参相当容易出。按着说明书就能出。我分析是你前面的问题。 |
3楼2011-08-14 08:43:44
adslye
银虫 (正式写手)
- BioEPI: 10
- 应助: 6 (幼儿园)
- 贵宾: 0.244
- 金币: 364.9
- 散金: 766
- 红花: 6
- 帖子: 514
- 在线: 119.5小时
- 虫号: 845336
- 注册: 2009-09-11
- 性别: GG
- 专业: 流行病学方法与卫生统计
4楼2011-08-14 09:26:14
