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duanming123

木虫 (正式写手)

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[求助] actin扩不出来？

刚反转录出的cDNA, actin扩不出来，引物没问题，用的是Mix,模板稀释了5倍，RNA质量还行，是不是模板浓度太高了，在稀释做做？大家谁遇到种问题？

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1楼 2011-08-12 20:45:39

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银虫 (正式写手)

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【答案】应助回帖

★ ★
duanming123(金币+1): 5 2011-08-14 17:11:51
看天(金币+2): 鼓励回答 2011-09-09 11:41:39

解决方法：反转录按你的kit说明书做，不同公司体系中RNA的量不一样。PCR设阳性对照。
最可能问题：RNA的质量。你说的质量好包括RNA条带完整，OD比为1.9-2.0 ？反转容易失败很多是酚抽提后去除不完全，导致RNA中酚超标，体现为OD比很低。

赞一下(1人)

4楼2011-08-14 09:26:14

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