| 查看: 2089 | 回复: 17 | |||
[求助]
westen blot 转膜
|
|
做westen blot 时转膜结束后硝酸纤维素膜上未见预染的Marker 条带，翻看滤纸上也没见任何颜色，是出什么问题了嘛？ 我用的是200mA,1H,，放置时黑色板朝向黑面，没放错。 |
回复此楼» 猜你喜欢
262求调剂
已经有3人回复
-
303求调剂
已经有5人回复
-
300求调剂，材料科学英一数二
已经有17人回复
-
一志愿北京化工大学材料与化工（085600）296求调剂
已经有21人回复
-
307求调剂
已经有15人回复
-
286分调剂
已经有9人回复
-
求调剂323材料与化工
已经有8人回复
-
322求调剂：一志愿湖南大学 材料与化工（085600），已过六级。
已经有5人回复
-
0703化学321分求调剂
已经有6人回复
-
292求调剂
已经有10人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 求助，Western-Blot转膜不成功
已经有22人回复
- western blot中蛋白质转印问题
已经有17人回复
- western blot 求助，请高手指点一下
已经有8人回复
- westen blot 染色
已经有11人回复
- Western blot 检测胱氨酸谷氨酸转运体蛋白表达
已经有6人回复
- 求助Western-bot转膜问题
已经有25人回复
- 关于Western blot的抗体孵育阶段
已经有7人回复
- 关于western blot转膜
已经有20人回复
- 关于westen-blot实验的具体步骤及实验中注意的问题，请教！
已经有5人回复
- 【求助/交流】southern blot 转膜
已经有10人回复
- 【求助/交流】请教大分子量蛋白western blot转膜的一些问题
已经有10人回复
- 【求助/交流】Westen blot问题请教
已经有8人回复
- western blot 半干转膜后，发现条带个别缺失，不知道什么原因，请教各位
已经有1人回复
- 【求助/交流】细胞色素c
已经有4人回复
- western blot 转膜问题 期待高手解答
已经有10人回复
dianaofyezi
金虫 (正式写手)
- BioEPI: 1
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 1660.1
- 散金: 26
- 帖子: 721
- 在线: 67.1小时
- 虫号: 371239
- 注册: 2007-05-14
- 性别: MM
- 专业: 免疫生物学
2楼2011-08-09 14:59:23
3楼2011-08-09 15:12:26
|
本帖内容被屏蔽 |
4楼2011-08-09 15:58:56
|
本帖内容被屏蔽 |
5楼2011-08-09 16:00:12
6楼2011-08-09 16:28:22
小兵pp
银虫 (小有名气)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 299.1
- 散金: 1
- 帖子: 237
- 在线: 41.5小时
- 虫号: 1050874
- 注册: 2010-07-02
- 性别: GG
- 专业: 蛋白质组学
7楼2011-08-09 17:07:06
8楼2011-08-09 17:33:30
dianaofyezi
金虫 (正式写手)
- BioEPI: 1
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 1660.1
- 散金: 26
- 帖子: 721
- 在线: 67.1小时
- 虫号: 371239
- 注册: 2007-05-14
- 性别: MM
- 专业: 免疫生物学
9楼2011-08-09 17:51:54
★ ★ ★ ★ ★
silicare(金币+5): 鼓励交流 2011-10-24 11:52:38
silicare(金币+5): 鼓励交流 2011-10-24 11:52:38
|
SDS-page电泳时的预染Marker，在胶上有清晰的显示，加样Buffer的痕迹也很明显。但转膜后就没见任何有颜色的东西了。求原因求指教啊 转硝酸纤维素膜时用的电流是200mA，1h， 硝酸纤维素膜在放到胶表面前是用甲醇浸泡10秒钟的，这点老师叮嘱过的，应是不容更改的。 转膜时我是在托水盘中做的转印三明治，所以气泡的干扰可以排除。 转膜后封闭，封闭后一抗，一抗后PBST，洗三遍，一洗后二抗，然后再PBST洗三次，然后去离子水冲一下，然后染色，结果是没东西啊，呈现的是一片模糊的蓝色。 以前做的时候有时候会见蓝色带在膜上，有时候也会没有，但不管有没有最后的结果总会出条带的，就是好与差得区别，但现在直接是不出条带了！！！ 自我感觉转膜的嫌疑最大，但不能肯定。另最后染色时感觉膜表面油乎乎的，染色液很难均匀涂在表面。 |
10楼2011-08-10 12:35:32
