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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » westen blot 转膜
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dianaofyezi

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

转的蛋白有多大，在滤纸上看到预染的marker到上面去了么。如果怀疑没有转过去或者转过头了，用丽春红染色看看。难道是PVDF膜有问题？反正出了问题，一个一个的排除吧。
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52187644
11楼2011-08-10 16:08:18
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geek23

木虫 (小有名气)
拿膜时一定要带手套,否则手上的杂质,油脂之类的回会影响蛋白在膜上吸附.
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Bethechangeyouwishtosee.
12楼2011-08-13 18:40:13
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0710314

禁虫 (著名写手)
本帖内容被屏蔽
13楼2011-09-08 12:31:25
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silicare

荣誉版主 (文坛精英)

合伙创业版兼职版主

优秀版主
引用回帖:
10楼: Originally posted by 空蓝Y劫 at 2011-08-10 12:35:32:
SDS-page电泳时的预染Marker，在胶上有清晰的显示，加样Buffer的痕迹也很明显。但转膜后就没见任何有颜色的东西了。求原因求指教啊

转硝酸纤维素膜时用的电流是200mA，1h，

硝酸纤维素膜在放到胶表面前是用 ...

硝酸纤维素膜在放到胶表面前是用甲醇浸泡10秒钟的，这点老师叮嘱过的，应是不容更改的。

这一句话就说明问题了，你的理论基础太差。

你的实验八成是夹子放反了，膜可以转过头，但绝不会过头到一点都不剩
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14楼2011-09-08 14:29:28
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sfb1020

金虫 (小有名气)
是不是膜有问题了
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15楼2011-09-08 15:47:10
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迷情八月

金虫 (正式写手)
会不会是胶有问题，蛋白都跑出去了？
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16楼2011-10-23 22:45:56
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ronindan

新虫 (初入文坛)
★ ★ ★ ★
silicare(金币+4): 鼓励新虫发帖交流 2011-10-25 18:28:03
先看转膜的摆放是不是放反了
再看有没有转过
不然说不通啊
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17楼2011-10-24 17:34:31
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小新3858

木虫 (正式写手)
★ ★
silicare(金币+2): 谢谢参与 2011-10-25 18:27:53
推测原因有可能是：
1.膜跟胶的顺序放反了
2.电源插反了
我有一次就把电源插反了，结果转完就跟楼主说的一样，好好想想是不是做的时候没注意。
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18楼2011-10-25 09:26:55
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