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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 荧光定量怎么成了这样
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疯狂修行者

木虫 (正式写手)

[求助] 荧光定量怎么成了这样

我跑了荧光定量怎么撇腿呢？哪位大侠帮解决一下，谢谢。
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戒骄戒躁，坦荡做人，平常心做事，享受生活之美！！
1楼2011-08-03 10:47:32
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shuanyu0202

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

疯狂修行者(金币+1): 哦，可是左侧不够陡啊 2011-08-05 19:11:10
这个溶解曲线是正常的啊，溶解曲线如果是双峰的话说明有引物二聚体，你的挺好的
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6楼2011-08-05 11:49:34
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shuanyu0202

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

疯狂修行者(金币+2): 谢谢，我降低反应温度试试吧，引物我设了好多了，能出单峰的就很少，现在扩增效率又低，真郁闷！ 2011-08-12 14:16:55
引用回帖:
10楼: Originally posted by 疯狂修行者 at 2011-08-11 08:27:28:
现在扩增效率低怎么办？

怎么确定的扩增效率低呢？如果是因为CT值延迟的话，有几个原因：1.扩增效率低，反应条件不够优化。（设计更好的引物或探针；改用三步法进行反应； 适当降低退火温度；增加镁离子浓度等）。
2.PCR各种反应成分的降解或加样量的不足。
3.PCR产物太长。一般采用80-150bp的产物长度。
希望对你有所帮助，实验顺利。
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12楼2011-08-11 12:39:41
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